Czimmerer, ZsoltHuszár-Domokos, Apolka HajnalkaKiss, Máté2022-06-072022-06-072022http://hdl.handle.net/2437/334324A makrofágok a veleszületett immunrendszer meghatározó sejtjei. Fenotípusukra és funkciójukra a mikrokörnyezet aktuális állapota folyamatos ráhatással bír. A polarizációjuknak két szélsőséges végpontját különböztetjük meg, az LPS és IFNγ indukálta klasszikus (M1) aktiváció, melyre Th1 típusú, celluláris válaszreakció jellemző, valamint az IL-4 és IL-13 citokinek által indukált alternatív (M2) polarizációt, mely a makrofágok Th2 típusú (humorális) válaszát indítja be. Az alternatív makrofágok egy további kiemelkedő sajátsága a sérüléseket követő szöveti regeneráció, valamint az érnövekedés támogatása - növekedési faktorok termelése révén - mely patológiás körülmények között egyes betegségek progresszióját is elősegítheti, úgy mint, pl. az allergiás asztma, retinopátiák, endometriózis. Ismert, hogy az IL-4 által alternatívan polarizált makrofágok azonban képesek a vaszkularitás gátlásának fenntartásában kulcsszereppel bíró, anti-angiogenikus VEGFR1/FLT-1 (vaszkuláris endotheliális növekedési faktor receptor 1, fms receptor tirozin kináz 1) kifejezésére is. Ennek a jelenségnek szignál-függő, illetve molekuláris szintű szabályozása jelenleg ismeretlen, ezért kutatásaink során célul tűztük ki az FLT-1 receptor mRNS kifejeződés szabályozásának megismerését IL-4 által alternatívan aktivált egér eredetű csontvelői makrofágokban. A sejtek kezelését IL-4 citokinnel 1-3-6-24 órás időtartamban, a hipoxiás kezeléseinket hipoxiás kamrában (1%O2) 6 órás időtartamban, 3-4 donoron végeztük, vad típusú (C57BL/6), valamint STAT6 és EGR2 transzkripciós faktor hiányos egereken, mely transzkripciós faktorok az alternatív makrofág polarizáció aktív szereplői. Mintáinkat Trizol-os RNS izolálást követően reverz transzkripció során cDNS-sé írtuk át, majd SYBR Green festéket alkalmazó, specifikus primer szekvenciákkal, kvantitatív PCR (qPCR) módszer segítségével detektáltuk az Flt-1 gén mRNS szintű kifejeződését. Eredményeink alapján elmondhatjuk, hogy az IL4 általi Flt-1 kifejeződése normoxiás körülmények között teljes mértékben STAT6, illetve részlegesen EGR2 TF-függő. Az Flt-1 egy szabályozó enhancer-ének vizsgálata szintén IL-4 általi indukciót mutat. Hipoxia szignál alkalmazása mellett az IL-4 által polarizált makrofágokban az Flt-1 kifejeződése szinergisztikus aktivációt mutat. Eredményeink alapján azt feltételezzük, hogy az alternatívan polarizált makrofágok bizonyos körülmények között anti-angiogenikus hatással is rendelkezhetnek. Ennek bizonyítására azonban további vizsgálatok elvégzését tervezzük.49humakrofágVEGFR1angiogenezisDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Molekuláris biológia