Bácsi, AttilaSzénási, Tibor2024-08-212024-08-212024-05-06https://hdl.handle.net/2437/379110Az allergiás légúti gyulladásban már évtizedek óta ismert az allergénként viselkedő pollen fehérjék szerepe, azonban a pollenszemcsék nagyszámú nem-allergén fehérjét és nem fehérje alapú komponenst is tartalmaznak, melyeknek az allergiás reakció beindításában, fenntartásában és modulációjában betöltött szerepe nem kellően tisztázott. Kimutatták, hogy a parlagfű, és számos más allergiát okozó növényi pollen jelentős mennyiségű NADPH-oxidáz enzimet tartalmaz, amely enzimek a pollen hidratációjának hatására aktiválódnak és reaktív oxigén származékokat (ROS) termelnek. Vizsgálataink során a parlagfű (Ambrosia artemisiifolia) pollennek a légutak hámsejtjeire kifejtett hatását vizsgáltuk. Ehhez egy humán bronchoepiteliális sejtvonalat, a BEAS-2B-t használtuk. A parlagfű pollen ROS-képző kapacitásának meghatározása, egy redox-szenzitív fluoreszcens festék, a H2DCF-DA felhasználásával, fluoriméterrel történt. A parlagfű pollen BEAS-2B sejtekre gyakorolt hatásainak vizsgálata során az előzetesen H2DCF-DA-val feltöltött sejteket hidratálódott, intakt parlagfű pollenekkel kezeltük, különböző sejtfelszíni vagy citoplazmatikus receptorok és enzimek (PAR-1/2, TLR2, Dectin-1, COX-2) inhibitorainak jelenlétében és hiányában. A hámsejtekben kialakuló intracelluláris kalcium szint változások detektálása Fluo4-AM festék felhasználásával, fluoriméterrel történt. A sejtekből kijutó oxidált guanozin (8-OHdG), valamint a termelt IL-6 citokin és IL-8 kemokin mennyiségét ELISA módszerrel határoztuk meg. A mitokondriális ROS termelés mérése MitoSOX festék felhasználásával történt. Az eredmények alapján a parlagfű pollen két fázisban képes oxidatív stresszt létrehozni a légúti hámsejtekben. A kezdeti fázisban a pollen eredetű ROS okozza az oxidatív stresszt, majd a ROS termelést hámsejt eredetű, intracelluláris mechanizmusok veszik át, kalcium-szignál dependens módon. A parlagfű pollen komplex módon, többféle receptor / szignálútvonal aktiválásával indukálhatja a hámsejtek ROS termelését. A PAR-1/2, TLR2, Dectin-1 gátlás önmagában kismértékben, míg a COX gátlás szignifikánsan csökkentette a késői fázisú oxidatív stressz intenzitását. A sejtek IL-6 és IL-8 termelése szignifikáns mértékben csökkent antioxidánsok hatására, vagy az intracelluláris kalcium-szignál gátlása esetén. A parlagfű pollen kezelés hatására a mitokondriális ROS termelés mértéke nem változott szignifikánsan, így a mitokondriumok kizárhatók, mint a késői fázisú oxidatív stressz forrásai.34huallergia, oxidatív stressz, parlagfű, légúti gyulladásMedicine::Medical microbiologyHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.