Balajthy, ZoltánCsomós, Krisztián2010-12-032010-12-0320102010-12-03http://hdl.handle.net/2437/101018Therapy of acute promyelocytic leukemia (APL) primarily consists of an all-trans-retinoic acid/ATRA-based treatment, which results in terminal differentiation of leukemic cells toward neutrophil granulocytes. However this differentiation-induced therapy is often accompanied by organ infiltration of differentiating leukemic cell leading severe hyper-inflammatory response in lung as an even lethal side effect of ATRA-treatment, called retinoic acid syndrome (RAS). Administration of ATRA leads to massive changes in gene expression in APL cells, including down-regulation of cell proliferation related genes and induction of genes involved in immune functions of neutrophil granulocytes. One of the most induced genes by ATRA in APL NB4 cells is transglutaminase 2 (TG2). We have demonstrated that transglutaminase 2, after its induction, partially translocates into the nucleus, associates to the chromatin and is able to modify nuclear proteins by its acil-transferase activity during the differentiation process. The transglutaminase-catalyzed cross-link content of both the cytosolic and the nuclear protein fractions increased while NB4 cells underwent cellular maturation. Inhibition of cross-linking activity of TG2 by monodansylcadaverin in these cells led to diminished nitroblue tetrazolium (NBT) positivity, production of less superoxide anion, and decreased expression of gp91phox, the membrane-associated subunit of NADPH oxidase. Neutrophils isolated from TG2-/- mice showed diminished NBT reduction capacity, reduced superoxide anion formation, and down-regulation of the gp91phox subunit of NADPH oxidase, compared with wild-type cells. These results clearly suggest that TG2 may modulate the expression of genes related to neutrophil functions and is involved in the process of differentiation of neutrophil. ... ----- A mieloid eredetű neutrofil granulociták differenciálódása a csontvelőben indul, majd az innen kijutó előalakok a keringésben válnak érett funkcióképes sejtekké. A transglutamináz 2 (TG2) egy tiol és Ca2+-függő acil-transzferáz, amely peptidkötésben lévő glutamin γ-karboxamin csoportja és különböző elsődleges aminok, valamint fehérjék lizin oldalláncának ε-amino csoportja közötti kovalens izopeptid kötés kialakulását katalizálja. Az enzim az immunrendszer legtöbb sejtjében kifejeződik és bebizonyosodott róla, hogy számos biológiai folyamatban aktív szerepet játszik (pl. fagocitózis, a sejtek letapadása és vándorlása, látens TGF-β aktiváció stb). Annak ellenére, hogy a neutrofilokról ismert, hogy a differenciálódásuk során az enzim indukálódik és az érett sejtekben nagy mennyiségű aktív enzim mutatható ki, a TG2 ezekben a sejtekben, ill. a hozzájuk köthető immunológiai folyamatokban betöltött szerepe egyelőre tisztázatlan. Korábbi vizsgálataink alapján bebizonyosodott, hogy a promielocita sejtek neutrofil granulocita irányú differenciációja során a TG2 alapvető szerepet játszik az érett sejtek immunológiai tulajdonágainak kifejlődésében. Eredményeink azt mutatják, hogy a TG2 transzlokálódik a sejtmagba és ott keresztkötő aktivitásától függő módon részt vesz a sejtek éréséhez vezető génregulációs folyamatok szervezésében. Jelen értekezés célja a TG2-től függő regulációs események felderítése, valamint az enzim ezen folyamatokban betöltött szerepének tisztázása volt. ...86 p.hutransglutaminase 2transzglutamináz 2gene expressiongénexpresszióacute promyelocytic leukemiaakut promielocitás leukémiacell differentiationsejt differenciációneutrophil granulocyteneutrophil granulocitaElméleti orvostudományokOrvostudományok