Hájos, NorbertGregori, Erzsébet2019-01-232019-01-232018http://hdl.handle.net/2437/263174Az amygdala mandula alakú páros képlet, ami az emlősök agyának mediális temporális lebenyében helyezkedik el, a hippokampusztól rostrálisan. Részt vesznek többek közt a memória, a tanulás szabályozásában, a figyelem fenntartásában és a szenzoros információk érzelmi feldolgozásában. Munkánk során célul tűztük ki, hogy karakterizáljunk három, a bazolaterális amygdala komplex (BLA) területén sejtpopulációk szelektív vizsgálatára kiválasztott egértörzset. A Cre rekombinázt kifejező idegsejtek arányainak meghatározása után arra fókuszáltunk, hogy az összes serkentő, azaz CamKII+ sejt közül hány százalékuk fejezi ki ezt az enzimet. Végül arra kerestük a választ, hogy ezen állattörzsekben mennyire hatékonyan tudjuk a Cre rekombináz aktivitását adeno-asszociált vírus vektor (AAV) segítségével monitorozni. Ezeket a vizsgálatokat fluoreszcens immuncitokémiai festésekkel végeztük el, amelyekhez konfokális mikroszkóppal készítettünk felvételeket, végül Neurolucida 10.3 szoftver segítségével számszerűsítettük adatainkat. Eredményeink a következők: az általunk vizsgált három egértörzs (Arhgef6/Cre, Carpt/Cre és Rbp4/Cre) és egy riporter egérvonal kereszteződéséből származó utódok BLA-jában a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérjét expresszáló sejtek nagy százalékban CamKII+, vagyis serkentő fősejtek, és csak kis százalékban CamKII- -ak, vagyis feltehetően gátló interneuronok. Az Arhgef6/Cre és a Carpt/Cre törzs esetében ezen sejtek a BA területén, míg az Rbp4/Cre törzs esetében a laterális (LA) és a bazomediális (BMA) területén találhatók. Az Arhgef6/Cre törzs esetében a CamKII+ serkentő fősejtek nagy része a Cre-t kifejező zöld sejt, míg a Carpt/Cre törzs esetében a CamKII+ sejteknek csak kis része ZsGreen1 fluoreszcens fehérjét kifejező sejt. Az Rbp4/Cre törzs esetében az LA-ban a CamKII+ sejteknek valamivel kevesebb része zöld sejt, míg a BMA-ban a CamKII+ sejtek nagy százaléka Cre promótert kifejező zöld sejt. Az AAV vektorral injektált állatok esetében az Arhgef6/Cre törzs BA területén található neuron markert expresszáló (NeuN+) sejtek nagy része zöld fluoreszcens fehérjét (GFP) is kifejez, míg a Carpt/Cre törzsnél a BA-ban nagyobb százalékban találunk GFP- sejteket. Az Rbp4/Cre törzsnél az LA-ban a NeuN+ sejtek döntő többsége GFP-, míg a BMA-ban nagy részük GFP+. Ezen AAV vírusinjektált állatokban kapott eredmények mindhárom törzs esetében összevethetőek azzal, ahogy a riporter egerekben a zöld fluoreszcens proteint expresszáló sejtek aránya alakul a CamKII+ sejtek között. A számadatok azt tükrözik, hogy az AAV vírus segítségével ugyanolyan hatékonyan tudjuk a Cre rekombinázt expresszáló sejteket vizualizálni ezekben az egerekben, mint ahogy a ZsGreen1 fluoreszcens proteinnel jelölt specifikus riporter gén jelöli meg a sejteket.53huamygdalatranszgénagyegérserkentő fősejtekinterneuronokDEENK Témalista::Biológiai tudományok