Bácsi, AttilaFazekas, Fruzsina2018-06-222018-06-222018http://hdl.handle.net/2437/255247A dolgozatban a reaktív oxigén származékok (ROS) képződését vizsgáltuk parlagfű pollen indukált BEAS-2B sejteken. A sejteket különböző ideig (3, 6 és 24 óra) inkubáltuk intakt és hő által inaktivált parlagfű pollennel, majd az intracelluláris ROS szintekben bekövetkező változásokat egy redox-szenzitív fluoreszcens festék (2’,7’-dihidro-diklorofluoreszcein diacetát /H2DCF-DA/) segítségével mértük. Az intakt pollenekkel történő kezelést követően a sejtekben egy gyors, 3-4-szeres DCF fluoreszcencia intenzitás növekedést detektáltunk. A hőinaktivált pollenekkel kezelt sejtekben is emelkedett az intracelluláris ROS szintje, de csak 6 órával a kezelés kezdete után. Ez a megfigyelés felvetette annak a lehetőségét, hogy a pollenekkel történő szoros kontaktus az epitél sejtekben endogén ROS termelődését váltja ki. Az endogén reaktív oxigéngyökök egyik legfontosabb forrásának a redukált nikotinamid adenin dinukleotid foszfát-oxidázt (NADPH-oxidáz) találtuk. Ha a sejtek NADPH-oxidázát difenil-jodoniummal (DPI) gátoltuk, az intracelluláris ROS szintjének emelkedése a felére csökkent az RWP kezelést követően. Az endogén ROS másik forrásának a mitokondriumok elektrontranszport láncát feltételeztük. A mitokondriális ROS termelés méréséhez MitoSOX Red festéket használtunk. Megfigyeléseink szerint a sejtekből kiszivárgó MitoSOX Red festékkel a pollenszemek olyan intenzíven jelölődnek, hogy az megakadályozza a mitokondriális ROS termelés mikroszkópos és fluorimetriás detektálását a kísérleti rendszerünkben.40huparlagfű pollenROSNADPH-oxidázBEAS-2BDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Immunológia