Balázs, MargitEcsedi, SzilviaKiss, Tímea2010-05-042010-05-042010-052010-05-04http://hdl.handle.net/2437/95436Korábbi tanulmányaink során microarray technikával primer melanomák mRNS expresszióját vizsgálva, a rossz prognózissal társuló mintákban a legmagasabb génexpressziós értéket a számos jelátviteli folyamatban fontos szerepet játszó osteopontin génre kaptuk. Tanulmányunk célja előzetes eredményeink megerősítése és az osteopontin fehérje expressziójának meghatározása, továbbá azon klinikai paraméterek definiálása, melyekre a molekula expressziós szintbeli különbsége karakterisztikusan jellemző. Munkánk során 53 archivált primer melanomából készítettünk Tissue Microarray-t, a fehérje expresszióját epitóp specifikus antitest segítségével vizsgáltuk. A digitalizált TMA metszeteket MIRAX Viewer Software-rel értékeltük. Az osteopontin mRNS szintjének meghatározását valós idejű Q-PCR-rel végeztük. Q-PCR-rel detektált eredményeink megerősítették munkacsoportunk korábbi microarray eredményeit. A fehérje kifejeződését egy minta kivételével minden esetben tapasztaltuk. A tumor mátrix több mint 50%-ára jellemző intenzív antigén pozitivitás a daganatok kifekélyesedésével társult. Fehérje- és génexpressziós eredményeink nem mutattak egyértelmű összefüggést; az osteopontin antigén nagy arányú, erős pozitivitása mellett előfordult alacsony, míg a fehérje kisebb mértékű kifejeződése számos esetben magas mRNS szinttel társult. Az osteopontin fehérje kimutatását 4 melanoma sejtvonalon is elvégeztük, melyek közül a metasztázis eredetű sejtek nagyobb arányú és erősebb expresszióját találtuk. Kísérleteink alapján megállapítjuk, hogy a kifekélyesedő minták karakterisztikus jellemzője a magas osteopontin gén- és fehérje expresszió, továbbá in vitro rendszerben kimutatott fehérje expressziós eredményeink lehetővé teszik, hogy a későbbiek során a molekula jelátvitelben betöltött szerepét részletesen tanulmányozzuk.40humelanomaosteopontinDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Genetika