Bay, PéterAbdul Rahman, OmarNagy, Kitti2016-05-062016-05-062016http://hdl.handle.net/2437/226633Munkám során olyan vektor konstruktot hoztam létre, amely AMPKα1 specifikus, géncsendesítésre alkalmas oligonukleotidokat tartalmaz. Ehhez a pSuper plazmidot használtuk, mely egy olyan emlős expressziós vektor, amely az siRNS molekulák intracelluláris szintézisét teszi lehetővé. Az oligok tervezését a Serial Cloner szoftver segítségével végeztük, a génspecifikus szekvenciákat nyilvános adatbázisokból (Sigma) kerestük ki. Miután megterveztük az oligókat a ligálás következett mellyel létrehoztuk a rekombináns DNS-t.A kész plazmiddal kompetens DH5α sejteket transzformáltunk, majd szelektív táptalajon növesztettük őket. A pozitív klónokat EcoRI és HindIII kettős emésztéssel szűrtük. A kész konstruktot AMPKα1 gén csendesítéséhez fogjuk felhasználni MCF-7 emlőrák sejtekben.21huAMPKα1shRNSRNS interferenciaDEENK Témalista::Biológiai tudományok