Az endotél sejtek barrier funkciója fontos szerepet tölt be a szervek megfelelő működésében, melyben központi szerepet játszik az endotél sejtek citoszkeletonjának és az ehhez kapsolódó fehérjéknek a foszforiláltsági szintje. A TIMAP (TGF-gátolt membrán asszociált fehérje) a protein foszfatáz 1 katalitikus alegységének (PP1c) regulátor alegységeként azonosított fehérje, melynek expressziós szintje endotél sejtekben nagyon magas más sejttípusokhoz képest. Több kölcsönható partnere ismert, melyekkel együtt a TIMAP fehérjének fontos szerepe van a barrier funkció fenntartásában. Munkánk során sikeresen azonosítottuk az eukarióta elongációs faktor 1 A 1 (eEF1A1) fehérjét, mint új TIMAP kölcsönható partnert. Igazoltuk, hogy a két fehérje kölcsönhatásában fontos szerepet kap egy, a TIMAP szekvenciájában fellelhető rövid peptid szakasz, melyet transzkripció-függő nukleáris export motívumnak (TD-NEM) neveznek. A TD-NEM megléte esszenciális a két fehérje kölcsönhatásában, a motívum második konzervált aminosavának glicinről alaninra történő cseréje negatív hatással volt az eEF1A1-TIMAP interakcióra. A mutáns rövidített TIMAP fehérje döntően a sejtmagban lokalizálódott, ugyanakkor az eEF1A1 csendesítése nem volt hatással a TIMAP sejtmagi exportjára. Ezen kívül igazoltuk, hogy a PP1c-TIMAP kölcsönható partnere a tumorszuppresszor merlin (moezin-ezrin-radixin like protein) fehérjének. Kimutattuk, hogy a PP1c-TIMAP komplex a merlin Ser518 oldalláncon foszforilált formájával is kölcsönhatásba lép, mely oldallánc foszforiláltsága/defoszforiláltsága kulcsszerephez jut a fehérje tumorszuppresszor funkciójában. Feltérképeztük a két fehérje közötti kölcsönhatást, amikor is azt találtuk, hogy a TIMAP N-terminális felével, míg a merlin a FERM-doménjén keresztül vesz részt a kölcsönhatásban. A TIMAP csendesítését vizsgálva azt tapasztaltuk, hogy a TIMAP fehérje hiányában a merlin nem tudott kötődni a PP1c enzimhez. A merlin és a MYPT1 kölcsönhatását sem a TIMAP fehérje jelenlétében, sem hiányában nem tudtuk detektálni. Immunfluoreszcens festést követően kimutattuk, hogy a foszfo-Ser518-merlin szintje megemelkedett a sejtek plazmamembránjában. Specifikus foszfatázgátlók alkalmazását követően arra az eredményre jutottunk, hogy a specifikus PP1 gátló tautomicetin hatására szignifikánsan megemelkedett a foszfo-Ser518-melin szintje, ami a PP1c-TIMAP komplex szerepét igazolja a foszfo-Ser518-merlin defoszforilációjának szabályozásában. Az itt leírt két új TIMAP kölcsönható partner azonosításával tovább bővültek ismereteink a TIMAP endotél sejtekben betöltött – láthatóan – sokszínű funkcióiról.TIMAP (TGFβ-inhibited membrane associated protein) is a highly abundant in endothelial cells (EC). It is a member of the MYPT (myosin phosphatase target subunit) protein family, and a regulatory subunit of PP1c. In this study, we identified eEF1A1 (eukaryotic translation elongation factor 1 A 1) as a new interacting partner of TIMAP. Besides its canonical role in translation, eEF1A1 may participate in the nuclear export of proteins with TD-NEM (transcription-dependent nuclear export motif), a newly recognized nuclear export signal (DxGxxDxxL) which is crucial in binding to eEF1A1 and in the nuclear export. TIMAP localizes in the nucleus and at the plasma membrane in EC. Since TIMAP contains a region (DHGVRVDV) highly homologous to the TD-NEM motif, we hypothesized that eEF1A1 may be involved in the nuclear export of TIMAP. We found that this TD-NEM-like motif of TIMAP has a critical role in its specific binding to eEF1A1. However, according to our results eEF1A1 is not or not exclusively responsible for the nuclear export of TIMAP. Merlin (moesin-ezrin-radixin like protein), the product of neurofibromatosis type 2 (NF2) gene, was primarily recognized as a tumor suppressor, but it also functions as a membrane-cytoskeletal linker and regulator of multiple signaling pathways. The activity and localization of merlin is regulated phosphorylation at the Ser518 side chain. Merlin localizes in the nucleus when the Ser518 side chain is not phosphorylated, while the phosphorylated form is present in the cytoplasm and the plasma membrane. We showed that EC express both merlin 1 and 2 isoforms. Furthermore, we identified a protein-protein interaction between PP1c-TIMAP and identified the N-terminal part of TIMAP and FERM domain of merlin as critical regions of the interaction. In addition, we detected that TIMAP is able to bind phospho-Ser518-merlin. In EC co-immunoprecipitation of merlin with PP1c-TIMAP was also shown, but there was no detectable interaction between merlin and PP1c in TIMAP depleted cells. In addition MYPT1 is expressed in EC, but no interaction was detected with merlin regardless the presence or absence of TIMAP. Results of immunofluorescent staining of TIMAP depleted and nonsiRNA treated EC suggest that the complex regulates dephosphorylation of phospho-Ser518-merlin. To test whether PP1c is alone responsible for dephosphorylation of merlin, EC lysates were treated with specific phosphatase inhibitors. In the presence of tautomycetin, a potent PP1 inhibitor, the phosphorylation level of merlin was elevated implying that a type-1 phosphatase dephosphorylates phospho-Ser518-merlin. In summary, this work focused on two newly identified interacting partner of TIMAP in EC, which provide important informations about the role of TIMAP protein in EC.