A penicillium chrysogenum laktóz hasznosításának vizsgálata

Dátum
2007-06-13T15:05:04Z
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Kísérleteink azt mutatták, hogy az általunk vizsgált Penicillium chrysogenum törzsben a β-galaktozidáz aktivitás sejthez kötött. Jelentősebb extracelluláris aktivitást csak a sejtlízis megindulása után tapasztaltunk. A legjobb szénforrásnak a könnyen metabolizálódó glükóz, szacharóz, glicerin és érdekes módon a galaktóz bizonyult; a laktóz viszont kis biomasszát adó gyenge szénforrás, aminél még a pepton is könnyebben hozzáférhető energiaforrás a gomba számára. A vizsgált szénforrások közül csak a laktóz indukálta az enzimszintézist, a többi - köztük a galaktóz is - represszálta. Kísérleteink arra engednek következtetni, hogy Penicillium chrysogenumban az enzimnek egy indukció nélküli, derepresszált szintézise is megtalálható. Az egyes szénforrásokon mért cAMP koncentrációt vizsgálva feltételezhető, hogy Penicillium chrysogenumban sincs, hasonlóan más fonalas gombákhoz, közvetlen összefüggés a cAMP szint és a karbon represszió illetve szénéhezés között. A koffein hatását vizsgáló kísérletek eredményei azt mutatták, hogy a cAMP nem befolyásolta közvetlenül a β-galaktozidáz szintézist, viszont erősen gátolta a glükóz fogyást, ami valószínűleg a glükóz felvétel gátlásának tulajdonítható. A kapott eredmények, összevetve a penicillin bioszintézis szénforrás szabályozásáról eddig rendelkezésre álló ismeretekkel, megerősítik azt a feltételezést, mely szerint a szénhidrát hasznosítás és a penicillin bioszintézis szénforrás szabályozása hasonló mechanizmus révén valósulhat meg. Munkánk során intracelluláris β-galaktozidáz aktivitással rendelkező enzimet tisztítottunk Penicillium chrysogenumból, meghatároztuk enzimatikus sajátságait és összehasonlítottuk más enzimekkel. Emellett az enzimmel együtt tisztuló két fehérjét is részben azonosítottunk. A Penicillium chrysogenum β-galaktozidáz és N-acetil-β-D-hexózaminidáz meghatározott aminosav és gén szekvenciájának, és az enzimek néhány sajátságának egyezése, illetve a tisztított β-galaktozidáz hexózaminidáz aktivitása alapján feltételezzük, hogy az ipari, penicillin termelő törzsben a laktóz bontását egy egyéb aktivitással/aktivitásokkal is rendelkező, a laktózt viszonylag rosszul bontó glikohidroláz végzi. Ez is magyarázhatja, hogy a laktóz nehezen metabolizálható szénforrás, és más fajoktól eltérő szabályozást mutat. A fehérje érése/aktiválása feltehetőleg poszttranszlációs proteolízissel történik.

Leírás
Kulcsszavak
Forrás