Klinikai jellegű vizsgálatainkban a renin-angiotenzin rendszer (RAS) bizonyos genetikai polimorfizmusainak (ACE I/D; AGT M235T; AT1R A1166C) in-stent restenosisban (ISR) játszott szerepét vizsgáltuk, az ISR-re hajlamosító genetikai markerek azonosítása érdekében. A genotípusok meghatározása során az angiotenzinogén M235T polimorfizmus esetében az irodalomban leírt módszerek nem szolgáltattak egyértelmű eredményt. A PCR-RFLP alapú meghatározást ezért sikerrel továbbfejlesztettük (új primerpár tervezésével egy új restrikciós enzim felhasználását tettük lehetővé). A genotípusok meghatározását elvégezve azonban (várakozásainkkal ellentétben) nem találtunk összefüggést a vizsgált polimorfizmusok és az ISR között. Az alapkutatási téma során az eddig elsősorban szenzoros neuronokban jellemzett vanilloid receptor (TRPV1) stimulációjának hatásait vizsgáltuk izolált, perfundált patkány vázizomból (m. gracilis) izolált arteriolákon (érátmérő 80 Hgmm-en 132-223 µm). Eredményeink szerint a receptor stimulációja kapszaicinnel vazokonstrikciót váltott ki, amelyet a TRPV1 specifikus antagonista capsazepin felfüggesztett. RT-PCR reakcióval és immunhisztokémiai módszerekkel alátámasztottuk, hogy a TRPV1 expresszálódik az erek simaizomsejtjeiben, ami magyarázatul szolgálhat a TRPV1 aktiválás hatására bekövetkező konstrikcióra. A TRPV1 endogén agonista anandamid a TRPV1 foszforiláció függő deszenzitizációját váltotta ki vázizoméren és TRPV1-et overexpresszáló CHO sejteken egyaránt, ami arra utal, hogy anandamid a TRPV1 aktiválása helyett annak gátlásában játszhat szerepet. Végül igazoltuk, hogy a TRPV1 anandamid jelenlétében foszforiláció által regulált (metabotróp) receptorként is funkcionálhat.

Our clinical investigations focused on the association of the genetic polymorphisms (ACE I/D; AGT M235T; AT1R A1166C) of the renin-angiotensin system (RAS) with the in-stent restenosis (ISR) of coronary vessels. Our aim was to determine whether these polymorphisms are predictive markers of ISR. We set up the procedures to determine the genotypes of the patients and we improved the published PCR-RFLP based genotyping of AGT M235T polymorphism (by designing a new primer and the application of a new restriction enzyme). As a matter of the association of the gentical background of the patients with ISR, our data did not support a significant role of the determined polymorphisms in the development of ISR. Our basic research efforts were directed to the vascular functions of the vanilloid receptor (TRPV1), which is a non-specific cation-channel, characterized mainly in primary sensory neurons. Surprisingly, TRPV1 stimulation with capsaicin caused a vasoconstriction, which was inhibited by the specific antagonist capsazepine in isolated, perfused arterioles (vessel diameter 132-223 µm at 80 mmHg) of rat skeletal muscle (m. gracile). RT-PCR experiments and immunohistochemistry confirmed TRPV1 expression in the smooth muscle cells of blood vessels, which observation provides an explanation for the constriction. Next, effects of the endogenous TRPV1 agonist anandamide were studied. Anandamide caused a phosphorylation-dependent desensitization of TRPV1 in skeletal muscle arterioles and in TRPV1 overexpressing CHO cells. This suggests that anandamide may be an endogenous desensitizer of TRPV1 instead of being an agonist on this receptor. Finally, we demonstrated that TRPV1 can function as a phosphorylation-gated (metabotrop) receptor in the continous presence of anandamide.