Lineáris poliakrilamiddal borított kapillárisok előállítása fehérjék kapilláris zónaelektroforetikus elemzéséhez

Abstract

Munkánk során LPA-val bevont kapillárisokat készítettünk. A bevonat kialakítása három fő lépésből állt: a kvarc kapilláris felületének előkezelése (etching), a polimert tartó átmeneti, középső réteg kötése a protonált szilanol csoportokhoz (szililezés), és a szilil reagensen a polimer felső réteg kialakítása (polimerizáció). A bevonatokat ötféle módon állítottuk elő, az egyes eljárások a bevonás időtartalmában, az inkubációs időkben és az alkalmazott hőmérséklet tekintetében különböztek egymástól. Az LPA bevonatok tesztelésére egy három, meglehetősen különböző tulajdonságokkal bíró fehérje keverékoldatot (rituximab, hemoglobin, inzulin) használtunk, a CZE elválasztásához háttérelektrolitként 50 mM HCOOH (2,6 pH) alkalmaztunk. Az LPA-val bevont kapillárisok kiválóan alkalmasak fehérjék meghatározásához, a fali adszorpció kiküszöbölhető, szelektívebb, nagyobb elválasztási hatékonyságot biztosító elválasztást tesz lehetővé.