Kislevelű hárs (Tilia cordata M.) szövettenyészet kémiai vizsgálata

Abstract

Munkánk során Tilia cordata szövettenyészetből való hatóanyag meghatározás volt a cél. A munkánk két nagy fázisra osztható. Az első fázisban Tilia cordata murvalevelekől indítottunk szövettenyészetet, ami sikeresen fennmaradt, és fel tudtuk szaporítani olyan mértékben, hogy összesen legalább 10 g mintánk legyen, ami már elég a preparatív analitikához. A kallusztenyésztéshez WPM táptalajt használtunk, és hormonokkal egészítettük ki a tápközeget, hogy elősegítsük a kallusz indukciót: auxinként 2,4-diklórfenoxi-ecetsavat (2,4-D), citokininként pedig benzil-amino-purint (BAP) használtunk, 1 mg/ml, illetve 0,1 mg/ml koncentrációban. A szövettenyésztés során sikerült 24 g száraz tömegnyi kalluszt előállítanunk az analitikai vizsgálatokhoz. A második fázisban az előkészítő műveletek után (szárítás, extrahálás, zsírtalanítás) több lépésben oszlopkromatográfiával és HPLC-vel megtisztítottuk a vegyületet, majd VRK, LC-MS, és NMR vizsgálatok segítségével azonosítottunk egy bioaktív vegyületet a mintából. Azt tapasztaltuk, hogy a kalluszok egy kumaringlikozidot, az eszkulint termelik. Az eszkulin a közönséges vadgesztenye (Aesculus hippocastanum L.) legjellemzőbb vegyülete, ezen kívül a kumarinok megtalálhatóak több növénycsaládban: Fabaceae, Asteraceae, Rutaceae, Apiaceae családok esetében írták le a jelenlétüket, viszont Tilia fajok esetében nem ismert kumarinok jelenléte. 40