A növényi foszfoprotein foszfatázok működésének vizsgálata

dc.contributor.advisorFarkas, Ilona
dc.contributor.authorKatona, Frida
dc.contributor.departmentDE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2012-05-02T12:41:51Z
dc.date.available2012-05-02T12:41:51Z
dc.date.created2012-05-02
dc.date.issued2012-05-02T12:41:51Z
dc.description.abstractA protein foszfatáz 1 (PP1) fontos szerepet tölt be az állatok sejtciklusának szabályozásában, többek között a retinoblasztóma fehérjéket is defoszforilálja. Az Orvosi Vegytani Intézet és az MTA Szegedi Biológiai Központ együttműködésében végzett kísérletek előzetes eredményei szerint a rizs PP1 az egyszikűek sejtciklusának is fontos regulátora, defoszforilálja a retinoblasztóma-szerű fehérjéket. A növényi PP1 szubsztrátjainak azonosításához a rizs PP1 elleni antitestet kívánunk előállítani. Ebből a célból baktériumban termeltettünk rizs PP1 katalitikus alegységet. A rizsben található PP1 katalitikus alegységet kódoló Os01g0349400 gén cDNS-ét pET28a(+) plazmidba ligálva előállítottunk egy hexahisztidin-fúziós fehérje termeltetésére alkalmas bakteriális vektort. A vektor segítségével E. coli BLR sejtekben rekombináns fehérjét termeltettünk, amelynek SDS-PAGE segítségével meghatározott molekulatömege jól egyezett a számított molekulatömeggel, és a fúziós peptidszakaszra specifikus antitest segítségével Western blottal detektálható volt. Végezetül a termeltetett hexahisztidin-fúziós fehérjét nikkel-agaróz kromatográfiával csaknem homogén formában nyertük ki. Az eljárással antitest termeltetésére alkalmas, könnyen tisztítható rekombináns rizs PP1c-t tudunk előállítani.hu_HU
dc.description.correctorgj
dc.description.coursebiológiahu_HU
dc.description.degreeBschu_HU
dc.format.extent30hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/128259
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectfoszfatázokhu_HU
dc.subjectPP1hu_HU
dc.subjectprotein foszfatázhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Molekuláris biológiahu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Biológiai tudományok::Biokémiahu_HU
dc.titleA növényi foszfoprotein foszfatázok működésének vizsgálatahu_HU
Fájlok