Lágyszöveti kalcifikáció vizsgálata OsteoSense festés alapú képalkotó módszerrel, valamint az endoplazmás retikulum stressz szerepének vizsgálata a Daprodustat nevű prolil-hidroxiláz inhibitor érfali kalcifikációt fokozó hatásában

Abstract

A krónikus vesebetegség világszerte növekvő népegészségügyi probléma, amelyet magas kardiovaszkuláris mortalitás kísér. A CKD egyik fő szövődménye a vaszkuláris és lágyszöveti kalcifikáció, amely aktív, sejtszinten szabályozott folyamat, központi eleme az érfali simaizomsejtek oszteokondrogén fenotípusváltása. Munkánk egyik célja egy adeninnel és magas foszfáttartalmú táppal kiváltott CKD egérmodell kialakítása, valamint a kalcifikáció nem invazív kimutatása volt, specifikus OsteoSense fluoreszcens festék alkalmazásával. Másik célunk a DPD pro-kalcifikációs hatásának hátterében álló molekuláris mechanizmus feltérképezése volt, mely munkában használtuk az előzőekben kidolgozott CKD egérmodellt és a kalcifikáció detektálására optimalizált OsteoSense festést. Az in vivo képalkotási vizsgálatokkal igazoltuk, hogy az OsteoSense festék alkalmas a CKD-asszociált lágyszöveti kalcifikáció detektálására, különösen az aortában, vesében, szívben, tüdőben és májban. A kalcifikált szövetekben az oszteogén markerek expressziójának fokozódását is megfigyeltük. A DPD-vel kapcsolatos eredményeink igazolták, hogy a DPD hatékonyan megelőzi az anémia kialakulását CKD egerekben. Ugyanakkor negatív hatása is van a DPD-nek, ugyanis fokozza a kalcifikációt. In vitro és in vivo módszerekkel bizonyítottuk az UPR-ban jelentős funkcióval bíró ATF4 transzkripciós faktor központi szerepét a DPD kalcifikációt fokozó hatásában.