A TIMAP és az ERM fehérjék kapcsolata

Dátum
2014-05-06T09:58:19Z
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Az endotél sejtek barrier szerepének fenntartásában fontos szerepet töltenek be az ezrin, radixin és moezin fehérjék, melyek az endotél sejtekben összekötő szerepet látnak el, általuk képesek kapcsolódni az aktin citoszkeleton és a sejtmembrán transzmembrán molekulái. Összekötő szerepüket a reverzibilis foszforilációjuk szabályozza ezen szerepükön kívül a jelátvitelben is részt vesznek.. A MYPT családba tartozó TIMAP nagy mennyiségben kimutatható az endotél sejtekben, és specifikusan képes megkötni a PP1cß izoformáját, amelynek működését szabályozza. Célunk volt a TIMAP és az ERM fehérjék kapcsolatának kimutatása pull-down módszerrel. Az ERM fehérjéket GST-taggel ellátva E. coli sejtekben termeltettük, majd Glutation Sepharose 4B-n immobilizáltuk a GST-glutation kölcsönhatást felhasználva. Az immobilizált ERM fehérjéket BPAEC lizátummal inkubáltuk, majd mosási lépések után az eluált mintákban ellenőriztük az ERM, TIMAP és PP1cß jelenlétét.

Leírás
Kulcsszavak
TIMAP, ERM
Forrás