Fehérjék mono-ADP-ribozilációjának vizsgálata Streptomyces coelicolor-ban
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
Kutatásom célja, hogy izoláljak, majd azonosítsak Streptomyces coelicolor sejtkivonatából mono-ADP-riboziált fehérjéket, kihasználva a makrodomén ADP-ribóz-kötő képességét egy olyan módszerben, amelyben ötvözve van az affinitás kromatográfia és a tömegspektrometria. Célul tűztem ki a GST-Af1521 makrodomén fúziós fehérje funkcióképes vad (WT) és ADP-ribóz kötésre alkalmatlan mutáns (MUT) változatának termeltetését E. coli sejtekben.A GST- Af1521 WT és GST- Af1521 MUT változatainak felkapcsolását Sepharose-Gluthation oszloptöltetre abból a célból, hogy felhasználhatóak legyenek affinitás kromatográfiás fehérje izolálásra. Sepharose-Gluthation-GST-Af1521 makrodomén fúziós fehérjék felhasználásával izolálni és azonosítani ADP-ribozilált S. coelicolor fehérjéket.