Reporter gének expressziójának követése embrionális őssejt eredetű myeloid sejtekben

Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Az embrionális őssejtek számos olyan tulajdonsággal rendelkeznek amelynek köszönhetően gyógyászatban való alkalmazásuk rengeteg új lehetőséget tud biztosítani a betegek kezelésére. Az ES sejtekből létrehozott dendritikus sejtek felhasználhatóak vakcinaként tumor ellenes immunterápiákban, de jelenleg fennálló probléma, hogy az így létrehozott sejtek többsége még éretlen ami limitált aktivitással jár együtt. Azonban transzkripciós faktoraik azonosításával elérhetővé válik, hogy érett, működőképes sejteket hozhassunk létre. A génexpresszió vizsgálatának gyakran alkalmazott módja, hogy kémiailag indukálható transzgént építenek be a sejtek genomjába. Munkám során ES sejtekből myeloid progenitorokat differenciáltattam és nyomon követtem az általuk hordozott transzgén expresszálódását. Indukcióját doxiciklinnel lehet előidézni (Tet-on rendszer). A kísérleteim olyan sejtvonallal végeztem melyek reporter génjei zöld fluoreszcens fehérjét(GFP) kódolnak. Az őssejtek myeloid irányba való differenciáltatása OP9 sejtek és GM-CSF használata segítségével történik. Korábbi kísérletek már kimutatták, hogy a génindukció nem 100%-os,és a negatív sejtek nem hordozzák a transzgént. Ezeket a sejteket áramlási citometriával és geneticinnel könnyen ki lehet szelektálni, illetve további vizsgálatokat lehet folytatni, ami segíthet definiálni, hogy miért nem indukálódik minden sejtben a transzgént.

Leírás
Kulcsszavak
embrionális őssejt, reporter gén, myeloid sejtek
Forrás