GABA-erg gátló idegsejt típusok dendritjeinek szinaptikus térképezése a SEM technika segítségével
Fájlok
Dátum
Szerzők
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt
Az emlős agykéregben található GABA-erg gátló idegsejtek fejlődéstani és neurokémiai szempontból parvalbumint (PV), szomatosztatint (SOM) és vazoaktív intesztinális polipeptidet (VIP) kifejező fő csoportokra oszthatóak. Ezen gátló idegsejtek funkcionális jelentőségéről és a neuronhálózatokban elfoglalt helyzetéről egyre több információ áll rendelkezésünkre. Működésük jobb megértéséhez azonban nélkülözhetetlen a dendritjeikre érkező szinaptikus inputok pontosabb ismerete. A kísérletekhez egereket használtunk, amelyekben a SOM-t expresszáló idegsejtek hisztokémiai eljárással láthatóak. Fixálást követően az egér primer látókérgéből szövetblokkot vágtunk ki, amely mind a 6 agykérgi réteget tartalmazta. A szövetblokkból, az agykéreg negyedik rétegének szintjében, 1 db 60 μm vastagságú metszetet vágtunk, amelyen SOM- immunhisztokémiai reakciót végeztünk. Ezután a metszet két felszíne felőli szövetblokkokat elektronmikroszkópos (block-face SEM, Zeiss-Gemini-3 és Gatan Inc.) vizsgálatra készítettük elő. Az egyik blokk az 1-4., a másik blokk a 4-6. agykérgi rétegeket tartalmazta. A “tükör- technika” segítségével, a SEM-blokkok felszínén azonosítottuk a SOM-immunjelölt sejttesteket és követtük a belőlük kiinduló dendriteket. A dendritek követésére több száz, egyenként 50 nm-es szintet használtunk. Ezen módszer előnye, hogy a dendritek teljes hosszukban követhetők és nem kell számolni a hagyományos elektronmikroszkópos metszetekben jelentkező műtermékekkel.