Az orbita fibroblasztok adipogenezisének szerepe az endokrin orbitopathia patogenezisében

Abstract

Az endokrin orbitopathia (EOP) a Graves-kór leggyakoribb extrathyroidális manifesztációja, melynek kialakulásában kulcsszerepet játszik az orbita fibroblasztok (OF) aktivációja és adipogén irányú differenciálódása. A folyamat során jelentősen fokozódik a hialuronsav (HA) termelése, amely hozzájárul a retrobulbáris szövetek ödémájához és a klinikai tünetek kialakulásához. Jelen vizsgálat célja annak feltárása, hogy a Cyclosporin A (CsA) miként befolyásolja az OF-okban az adipogenezist, a lipidfelhalmozódást, az adipogenezishez kapcsolódó gének expresszióját, valamint a HA termelést. Kísérleteink során primer humán EOP (n=4) orbita fibroblaszt tenyészeteken adipogenezist indukáltunk, majd a folyamatot 10 μM CsA kezeléssel egészítettük ki. A lipidfelhalmozódást Oil Red O és Nile Red festéssel, a HA termelést ELISA módszerrel, míg a génexpressziós változásokat RT-PCR technikával vizsgáltuk (PPARγ, CEBPα, FABP4). A méréseket a vagy végpontmérésben, vagy pedig időfüggésben, a differenciálódás 0., 4., 8. és 12. napján végeztük. Eredményeink igazolták, hogy a CsA kezelés hatására a lipidakkumuláció csökkent (p<0,001 az Oil Red O, és p=0,017 a Nile Red festés esetében). A CsA kezelés emellett gátolta az adipogenezishez kapcsolódó gének expresszióját: a PPARγ expressziója minden vizsgált időpontban (p<0,001), míg a CEBPα és a FABP4 szintek a differenciálódás későbbi szakaszában (p<0,05) mutattak csökkenést. A kezelés továbbá drasztikusan mérsékelte mind a felülúszóban, mind a pericelluláris térben található HA mennyiségét (p<0,001). Eredményeink alapján a CsA nemcsak immunmoduláns hatásán keresztül, hanem közvetlenül az orbita fibroblasztokra hatva is gátolja az adipogenezis folyamatát és a HA szintézist. Ez a pleiotróp hatás hozzájárul a retrobulbáris szövetek volumen növekedésének csökkentéséhez.