A humán SPINK1 fehérje hasnyálmirigy-gyulladásban azonosított misszensz mutációinak hatása az ortológ egér fehérje szekréciójára
Fájlok
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
A krónikus hasnyálmirigy-gyulladás egy progresszív funkcióvesztéssel járó betegség, amelynek kialakulásában főként környezeti tényezők mellett genetikai hajlamosító tényezők, különösen a SPINK1 gén mutációi is szerepet játszanak. Bár a genetikailag módosított egerek széles körben alkalmazott modellek a hasnyálmirigy-gyulladás kutatásában, a SPINK1 mutációt hordozó egereket eddig még nem használták betegségmodellezésre. A legtöbb humán SPINK1 mutáció a fehérje szekréciójának csökkenését okozza, azonban az aminosav-sorrend különbségei miatt ezek eltérően viselkedhetnek egérmodellekben. A kutatás célja az volt, hogy 12 ritka humán misszensz SPINK1 mutáció hatását vizsgáljuk az egér SPINK1 fehérje szekréciójára és működésére. Ennek érdekében szekvencia-specifikus mutagenezissel hoztuk létre a mutációkat egér SPINK1 expressziós plazmidban, majd emlős sejtek transzfekcióját követően elemeztük a variánsok tripszin-gátlási aktivitását. A kísérletek során meghatároztuk a szekretált SPINK1 variánsok koncentrációját a kondícionált médiumban, valamint a sejtlizátumokban jelen lévő fehérje mennyiségét is.