Az antimikrobiális hatású RNase7/Fc fúziós protein funkcionális vizsgálata

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorAntal-Szalmás, Péter
dc.contributor.advisordeptLaboratóriumi Medicina Intézethu_HU
dc.contributor.authorVida, Eszter
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentGergely, Lajos
dc.contributor.opponentPénzes-Daku, Krisztina
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem Általános Orvostudományi Kar Biokémiai Intézethu_HU
dc.contributor.opponentdeptKlinikai Laboratóriumi Kutató Tanszékhu_HU
dc.date.accessioned2016-05-17T07:46:15Z
dc.date.available2016-05-17T07:46:15Z
dc.date.created2016
dc.description.abstractBevezetés: Az elmúlt évtizedekben az antibiotikum rezisztencia elterjedése globális méretű problémává vált, a rezisztens kórokozók ellen nyújtott kezelési lehetőségek egyre inkább kimerülőben vannak. Az antimikrobiális kutatások új irányvonalát jelenthetik a PRR/Fc fúziós proteinek létrehozása. Ezek a mintázatfelismerő receptor (PRR) doménnal rendelkező, a humán IgG1 Fc részével fuzionáltatott mesterséges antitestek képesek felismerni a patogének konzervatív struktúráit, és opszoninként működve immunológiai funkciókat modulálhatnak. Munkacsoportunk egy RNase7/Fc fúziós fehérjét hozott létre, és ennek vizsgáltuk meg a biológiai aktivitását. Módszerek: Az új fúziós fehérje tesztelése során először kötődési vizsgálatokat végeztünk. Különböző baktériumokat inkubáltunk az RNase7/Fc fúziós proteinnel, majd egy fluoreszcensen jelölt (PE) anti-humán IgG antitesttel vizsgáltuk a kötődés mértékét áramlási citométer segítségével. Egy másik kísérlet során az opszonizált baktériumokhoz Protein A/G-sepharose beadeket adtunk és fluoreszcens mikroszkóp alatt vizsgáltuk a gyöngyökhöz kötődött baktériumokat. Az RNase7/Fc opszonizáló hatását áramlási citometriás fagocitózis kísérletekkel vizsgáltuk, FITC-cel jelölt baktériumokat és makrofágokat, dendritikus sejteket és perifériás vérből izolált neutrofil granulocitákat tesztelve. A baktériumok internalizációját konfokális pásztázó lézer mikroszkóppal ellenőriztük. Eredmények: Az RNase7/Fc fehérje a Gram-negatív baktériumokhoz kötődött erősen, különösen a rövid LPS (Re) mutánsok esetében, és jellegzetes koncentráció és inkubációs idő függést mutatott. A maximális kötődés 5-10 μg/ml RNase7/Fc és 2-4 óra inkubálás után jelentkezett. A fúziós fehérje kötődése a Gram-negatív baktériumokhoz gátolható volt LPS-sel, de peptidoglikán vagy muramil-dipeptid molekulákkal nem. Az opszonizált baktériumok jól kötődtek a Protein A/G-sepharose beadekhez is. A fagocitózis kísérletek során az RNase7/Fc fokozta a Gram-negatív baktériumok fagocitózisát és internalizációját a vizsgált sejtek esetében. Következtetések: Az expresszált RNase7/Fc fúziós fehérje opszoninként viselkedik, kötődik Gram-negatív baktériumokhoz, és fokozza azok fagocitózisát.hu_HU
dc.description.correctorgj
dc.description.coursegyógyszerésztudományihu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.degreeegységes, osztatlanhu_HU
dc.format.extent43hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/227463
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectfusion proteinhu_HU
dc.subjectfúziós protein
dc.subjectantimikrobiális
dc.subjectRNase7/Fc
dc.subjectantibiotic resistance
dc.subjectantibiotikum rezisztencia
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudomány::Gyógyszerésztudományhu_HU
dc.titleAz antimikrobiális hatású RNase7/Fc fúziós protein funkcionális vizsgálatahu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (GYTK)