PACAP hatásai mesenchymalis eredetű chondroprogenitor őssejtek differenciációjára

Abstract

A PACAP egy kis méretű neuropeptid, melyet elsőnek a központi idegrendszerből izoláltak, azonban mára tudjuk, hogy számos perifériás szövetben is jelen van és több fejlődéstani folyamatban, például a chondrogenesisben is szabályozó szerepet játszik. A PACAP 1-38 a PAC1 receptoron keresztül a Sox9 transzkripciós faktort regulálja, mely a chondrogenesis mestergénjeként is ismert. A chondroprogenitor őssejtek (CPC) normál körülmények között is jelen vannak a porcszövetben, azonban osteoarthritis esetén a synovialis térbe vándorolnak a subchondralis területekről, azaz jelentős migratórikus képességekkel rendelkeznek. Ezek az őssejtek segíthetnék a porcregenerációt, azonban in vivo körülmények között erre nagyon kis esély van valamilyen külső beavatkozás nélkül. Éppen ezért kísérleteink célja volt, hogy pontosabb képet kapjunk a CPC sejtek differenciációs mechanizmusairól a PACAP 1-38 kezelések hatására. Kísérleteink során monolayer sejtkultúrákat hoztunk létre, melyeken szintetikus PACAP 1-38 kezeléseket alkalmaztunk. Kontrollként kezeletlen kultúrákat használtunk. Munkánk során vizsgáltuk a sejtek életképességét, migrációs aktivitását, továbbá sejtmorfológiai analízist készítettünk, valamint vizsgáltuk a chondrogenikus differenciáció szempontjából fontos Sox9 és CREB transzkripciós faktorokat is. Eredményeink alapján elmondhatjuk, hogy a PACAP 1-38 kezelés nem eredményez citotoxikus elváltozásokat kultúráinkon. A PACAP 1-38 kezelések hatására a sejtek morfológiája megváltozik, elkezdik az extracelluláris matrix termelését, továbbá fokozódik a Sox9 transzkripciós faktor expressziója. Ezekkel a folyamatokkal párhuzamosan a sejtek elvesztik nagy mértékű migratórikus aktivitásukat, mely a chondrogenikus differenciációt feltételezi. Eredményeink felvetik a PACAP 1-38 gyógyászati alkalmazásának lehetőségeit osteoarthritisben szenvedő betegek esetében.