Clock gene expression in cultured pre-adipocyte and adipocyte cells

Abstract

Szinte minden élő organizmus és emberi sejt tartalmaz úgynevezett ’Clock’ géneket, amely a sejtek cirkadián ritmusát irányítják. Ma már tudjuk, hogy számos élettani folyamat, mint metabolizmus, hormon szekréció, szívműködés napi változások által szabályozott. A cirkadián ritmus közel 24 órás periódus, amely segíti a sejtek alkalmazkodását a külső környezeti variációkhoz, mint például az éjszakák-nappalok váltakozása, hőmérséklet, ételfogyasztása stb. A kutatásban 3T3-L1 egér embrió fibroblasztból deriváltatott sejteken dolgoztunk és mutattuk ki a cirkadián ritmusát in vitro. A lentivirális transzdukcióval bejutattuk a sejtekbe a Bmal1 vagy a Per2 clock géneknek a promoterét, valamint luciferáz riportert, amely lumineszcens vizsgálatot tett lehetővé a Lumicycle luminometer készülékben. A munkánk során a vizsgálatokat elvégeztük 3T3L−1 pre-adipocitákon valamint a belőlük deriváltatott adipocita sejteken.