β-D-Mannoszintáz kristályosítása

Abstract

Szakdolgozatom alanya és témája a mannozil transzferáz aktivitása miatt érdekes, mutáns β-mannoszintáz enzim. Hosszú távú célunk a molekula háromdimenziós térszerkezetének felderítése, PDB adatbázisba való felvétele. Rövidtávon a szerkezet felderítéséhez használni kívánt röntgendiffrakciós vizsgálathoz szeretnénk előállítani a megfelelő minőségű fehérje egykristályt. Munkám közvetlen célja a β-mannoszintáz enzim E. coli BL21 törzsben való termeltetési és növesztési körülményeinek optimalizálása, a fehérje tisztítása olyan minőségben, hogy az kristályosításhoz is használható legyen, valamint az enzim kristályosítási körülményeinek felderítése.