A Mediátor komplex Sep10/Med31 alegységének komplementációs vizsgálata hasadóélesztőkben
Dátum
Szerzők
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt
Bioinformatikai módszerekkel megkerestük a Schizosaccharomyces pombe sep10/ MED31 génjére és az általa kódolt fehérjére nagymértékben hasonlító Schizosaccharomyces japonicus gén és fehérje szekvenciáját. Az azonosított gént (SJAG_04647.2) sikeresen klónoztuk egy tiamin által represszálható expressziós plazmidba (159. plazmid - pYZ1N). Az így előállított vektorral (264. plazmid) transzformáltunk egy sep10 deléciós mutáns Sch. pombe törzset. A transzformánsokat morfológiai vizsgálatoknak vetettük alá, majd megállapítottuk, hogy a vizsgált géntermék komplementálja a mutáció okozta fenotípust. A hifás fenotípus megszűnt, a sejtek a citokinezist hibátlanuk hajtották végre. Spóráztató körülmények között az ivari differenciálódás folyamatai végbementek: a sejtek konjugáltak és aszkuszt képeztek. A fenti eredmények alapján sikeresen azonosítottuk a Sch. japonicus sep10/MED31 génjét, mely ortológiát mutat a Sch. pombe hasonló nevű génjével.