Az antitest-függő SARS-CoV-2 fertőzés felerősödésének vizsgálata

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorTőzsér, József
dc.contributor.advisorMiltner, Noémi
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet
dc.contributor.authorKiss, Tifani
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Kar
dc.contributor.opponentLászló, Brigitta
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Orvosi Mikrobiológiai Intézet
dc.date.accessioned2023-01-31T10:58:42Z
dc.date.available2023-01-31T10:58:42Z
dc.date.created2022
dc.description.abstractA COVID-19 a SARS-CoV-2 által okozott légzőszervi megbetegedés, amelyet 2019-ben először a kínai Wuhan városban azonosítottak, mára már globális pandémiává nőtte ki magát. A COVID-19 megbetegedés többféleképpen végbe mehet, a tünet nélküli megbetegedéstől egészen a krónikus megbetegedésig. Más súlyos lefolyású vírusfertőzésben, pl: Dengue vírusfertőzés, MERS, szerepet játszik az úgynevezett antitest-függő immunválasz felerősítés (antibody dependent enhancement ~ ADE), amely során az antitestek elősegítik a vírusok gazdasejtbe jutását. Egyes tanulmányok szerint a SARS-CoV-2 vírusfertőzés során is felmerülhet az ADE jelensége, így jelen dolgozatban egy ADE vizsgálatára alkalmas modellrendszer optimalizálását végeztük el, önkéntes donorok szérummintáinak felhasználásával. A kísérleteink során humán THP-1 monocita sejtek tenyésztésével és PMA-val való aktiválásával monocita-eredetű makrofágokat (MDM) differenciáltattunk. BSL-2 laboratóriumban (BLS-2) második generációs lentivirális vektorrendszer alapú SARS-CoV-2 Wuhan-i és dél-afrikai (South African ~ SA) Spike (S) variáns pszeudovirionokat állítottunk elő HEK293T sejtek felhasználásával, amelyeket Amicon csővel koncentráltunk. A koncentrált pszeudovirionok reverz-transzkriptáz (RT) enzim aktivitását RT-ELISA módszerrel, míg a S fehérje koncentrációját Spike ELISA segítségével vizsgáltuk. A termelt pszeudovirionokat alkalmazva az aktivált THP-1 eredetű makrofágokat transzdukáltuk Wuhan-i és dél-afrikai (South African ~ SA) Spike variáns pszeudovirionokkal, kontrollként pedig VSV.G pszeudoviriont használtunk. Ezt követően 48 óra múlva a mintákat áramlási citometriás méréssel analizáltuk és vizsgáltuk az MDM-ek vírusfertőzöttségének mértékét és az ADE jelenség előfordulását vagy hiányát. Továbbá feltérképeztük a SARS-CoV-2 vírusbejutáshoz szükséges ACE2 és TMPRSS2 fehérjék kifejeződését is a MDM sejtekben, Western blot technika alkalmazásával. Eredményeink alapján a MDM-ok kifejezik az ACE2 és a TMPRSS2 fehérjéket, a megtermelt pszeudovirionok pedig a Spike fehérjét. Az áramlási citometriás vizsgálattal kapott eredmények alapján mind a SARS-CoV-2 Wuhan-i Spike, SA variáns esetén és VSV.G kontroll esetén is sikeres volt a MDM-ok transzdukciója. Összegzésként elmondható, hogy az ADE optimalizációs protokollt sikeresen beállítottuk, az önkéntes donorok mintáiból ADE jelenséget viszont nem tapasztaltunk egyik SARS-CoV-2 S variáns esetén sem.
dc.description.correctorLB
dc.description.courseorvosi diagnosztikai analitikus
dc.description.courseactnappali
dc.description.courselangmagyar
dc.description.coursespecOrvosi kutatólaboratóriumi analitika
dc.description.degreeBSc/BA
dc.format.extent34
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/345256
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectADE
dc.subjectSARS-CoV-2
dc.subjectTHP-1
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudomány
dc.titleAz antitest-függő SARS-CoV-2 fertőzés felerősödésének vizsgálata
dc.title.translatedInvestigation of antibody-dependent enhancement in SARS-CoV-2 infection
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)