Az R-hurkok fiziológiás vizsgálata S9.6 anti-RNS-DNS hibrid antitesttel
Betöltés ...
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
Az R-hurok homeosztázis vizsgálatához klasszikus genetikai módszerekkel létrehoztunk egy mutáns élesztő (Saccharomyces cerevisiae) törzset, amelyben az RNáz H1 gén overexpressziójával moduláltuk a fiziológiás R-hurok szintet. A konstrukciót egy kétmikronos plazmidon juttattuk be az élesztőbe, amely magasszintű expressziót biztosított folyamatos szelekció mellett. Célunk az volt, hogy eltérést detektáljunk a kontroll és a mutáns élesztők R-hurok státuszában és az ezzel összefüggő fiziológiás paraméterekben. Ehhez növekedési vizsgálatokat végeztünk fotometriás mérésekkel, illetve különféle perturbációs tesztekkel felerősítettük a mutáns fenotípus kifejeződését. Az R-hurkok mennyiségét pedig qPCR analízissel ellenőriztük.