A TRPC6 és a melegszenzitív TRPV csatornák szerepe humán podocyták biológiai folyamatainak szabályozásában

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBíró, Tamás
dc.contributor.authorKardosné Ambrus, Lídia
dc.contributor.authorvariantAmbrus, Lídia
dc.contributor.departmentMolekuláris orvostudomány doktori iskolahu
dc.date.accessioned2019-10-02T07:49:19Z
dc.date.available2019-10-02T07:49:19Z
dc.date.created2019hu_HU
dc.date.defended2019-10-14
dc.description.abstractJelen munkánk során egyes TRP csatornák kifejeződését, funkcionalitását és szabályozását vizsgáltuk humán podocytákon. Kimutattuk, hogy a TRPC6 csatornát a PKC rendszer endogén aktivitása gátolja. Kísérleteinkben a PKC agonista PMA, jelentősen csökkentette a TRPC6 aktivátor OAG által kiváltható Ca2+-jelet. Hosszú távú PMA kezelés a TRPC6 expresszióját is jelentősen csökkentette. Valamint a PKC rendszer exogén gátlása csoportgátlószerek alkalmazásával növelte a TRPC6 aktivitását. Kimutattuk, hogy a PKCα, -β1, - β2 és -η fehérjék szintje csökken a PMA kezelés hatására, tehát feltehetően ezek az izoformák szabályozhatják a TRPC6-ot. Munkánk második felében igazoltuk, hogy differenciáltatott humán podocytákon kifejeződnek a melegszenzor TRPV1-V4 csatornák. A TRPV1 és a TRPV4 dominánsan, míg a TRPV2 és a TRPV3 alacsonyabb szinteken expresszálódnak. A TRPV1 csatorna a magas szintű mRNS jelenlét ellenére a specifikus agonista kapszaicin és reziniferatoxin (RTX) kezelés hatására sem mutatott aktivitást. Ezzel szemben kannabinoid (CBD) hatására a podocyták mérsékelt Ca2+-válaszokat mutattak, mely a TRPV2 antagonista tranilaszttal és a TRPV4 gátló HC067047-tel is gátolhatónak bizonyult. A TRPV4 agonisták, mind a GSK1016790A, mind a 4α-PDD gyors és robosztus Ca2+-választ generáltak, tehát a TRPV4 lehet a domináns termoszenzitív TRPV csatorna humán podocytákon. A TRPV3 esetében a növényi eredetű aktivátorok és a szintetikus 2-APB jelentős [Ca2+]IC-emelkedést váltottak ki. Ez a hatás azonban TRPV3 antagonistával (IPP), illetve általános TRP gátló ruténium vörössel csak részben volt gátolható, a TRPV3 gén csendesítése pedig nem befolyásolta az agonisták hatását, vagyis az általunk TRPV3 agonistaként alkalmazott anyagoknak számos off-target hatása lehet. Eredményeink a TRP csatornák és az azokat reguláló jelátviteli folyamatok szerepére hívják fel a figyelmet a podocyták működésének szabályozásában.hu_HU
dc.description.abstractIn our study, we investigated the expression, functionality and regulation of some TRP channels on human podocytes. We demonstrated that the endogenous activity of the PKC system blocked TRPC6. In our experiments, the PKC agonist PMA markedly suppressed the Ca2+-elevation which was induced by the TRPC6 activator OAG. Long-term treatment with PMA also decreased the expression of TRPC6. In addition, exogenous inhibition of the PKC system with blockers of PKC subfamilies enhanced TRPC6 acivity. We also showed that expression level of PKCα, -β1, -β2 and -η proteins were down-regulated by PMA treatment, so presumably, these isoforms can regulate TRPC6. In the second part of our study, we provided the first evidence for the functional expression of the heat-sensitive TRPV1-4 on human podocytes. TRPV1 and TRPV4 are highly expressed TRPV channels but TRPV2 and TRPV3 were also detected at lower levels. TRPV1 did not show activity after treatment with the specific TRPV1 activators capsaicin or RTX. In contrast, CBD induced moderate calcium influx which was inhibited by the TRPV2 antagonist tranilast, and the TRPV4 antagonist HC067047. Furthermore, investigating TRPV4, the classical agonist 4α-PDD and the hyperpotent activator GSK1016790A generated rapid and robust Ca2+-response. Therefore, TRPV4 can be the dominantly expressed thermosensitive TRPV in human podocytes. In case of TRPV3, the botanical compounds and also 2-APB induced marked Ca2+-elevation. This effect with hardly influenced by the TRPV3 antagonist IPP or only partially blocked by the general TRPV blocker ruthenium red. In contrast, RNAi mediated silencing of TRPV3 did not influence the effect of the agonists. These results suggest that TRPV3 agonists may have several off-target effects. Our findings confirmed that TRP channels and its regulatory systems play a crucial role in the regulation of human podocytes functions.hu_HU
dc.format.extent87hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/273913
dc.language.isohuhu_HU
dc.language.isoenhu_HU
dc.subjecthumán podocytahu_HU
dc.subjecttranziens receptor potenciál klasszikus 6 (TRPC6)hu_HU
dc.subjecttranziens receptor potenciál vanilloid 1 (TRPV1)hu_HU
dc.subjecttranziens receptor potenciál vanilloid 2 (TRPV2)hu_HU
dc.subjecttranziens receptor potenciál vanilloid 3 (TRPV3)hu_HU
dc.subjecttranziens receptor potenciál vanilloid 4 (TRPV4)hu_HU
dc.subjecthuman podocytehu_HU
dc.subjecttransient receptor potential canonical 6 (TRPC6)hu_HU
dc.subjecttransient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1)hu_HU
dc.subjecttransient receptor potential vanilloid 2 (TRPV2)hu_HU
dc.subjecttransient receptor potential vanilloid 3 (TRPV3)hu_HU
dc.subjecttransient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4)hu_HU
dc.subject.disciplineElméleti orvostudományokhu
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleA TRPC6 és a melegszenzitív TRPV csatornák szerepe humán podocyták biológiai folyamatainak szabályozásábanhu_HU
dc.title.translatedRole of TRPC6 and heat-sensitive TRPV channels in regulation of human podocyteshu_HU
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nincs kép
Név:
Ertekezes.pdf
Méret:
4.16 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
értekezés
Letöltés
Nincs kép
Név:
Tezis_magyar.pdf
Méret:
1.09 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
tézis magyar nyelven
Letöltés
Nincs kép
Név:
Short_thesis.pdf
Méret:
1.15 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
tézis angol nyelven
Letöltés
Nincs kép
Név:
Meghivo.pdf
Méret:
254.35 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
meghívó
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola