Rekombináns adenozin 2A receptor kifejezése emlős sejtekben
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
A munkám során egy gyulladásos folyamatban fontos szerepet játszó receptorral foglakoztam, nevezetesen az adenozin 2A receptorral. Célom az volt, hogy kialakítsak egy olyan molekuláris eszközt, mellyel követni tudom a fehérje-expressziót és nyomon tudom követni a vándorlását. Metabolikus stressz hatására a szervezetben megnő az extracelluláris adenozin koncentrációja. Munkám folyamán ezen receptor kódoló szekvenciáját pmaxGFP emlős expressziós vektorba illesztettem be. Az elkészült konstruktot transzfekciós módszer segítségével HEK293 jelű sejtekbe vittem be, hiszen ezen sejtek könnyen fel tudják venni a plazmidot és bizonyos mértékig képesek idegen fehérjét termelni. A kísérletezést ezután nagy mennyiségű fehérje termeltetésével folytattam szintén HEK293 jelű sejtekben. A munkámat ezután azzal folytattam, hogy RAW264.7 jelű makrofágba vittem be elektroporációs eljárással. Ezen sejtek esetében is a fehérje kifejeződést követtem nyomon. Mind a két esetben High Conent Screening (Perkin Elmer) mikroszkóp segítségével végeztem a kísérleteket.