Glikogén-foszforiláz enzim kinyerésének optimalizálása
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
A munkánk során a glikogén-foszforiláz enzim tisztítását tűztük ki célul. Nyúl vázizomból szerettünk volna kinyerni tiszta, kristályos enzimet. Dolgozatomban összefoglaltam a lehetséges fehérjetisztítási módszereket.A nyúl vázizomból történő preparálás során több tisztítási lépést alkalmaztunk: acetonos zsírtalanítást, vizes extrahálást és ammónium-szulfátos kicsapást. Ezután egy ioncserélő kromatográfiát végeztünk. A kapott minták fehérje tartalmát Warburg Christian módszerrel és SDS-PAGE módszerrel ellenőriztük. Glikogén-foszforiláz b enzim kimutatását a CNP-G7 láncrövidítési reakciójával és szintézis reakcióban felszabaduló foszfát meghatározásával végeztük.Végül méretkizárásos és ultraszűréses módszerrel próbáltuk tovább tisztítani az enzimet, de ez a két módszer nem vezetett eredményre, az enzim elveszítette aktivitását a tisztítás során.
Leírás
Kulcsszavak
Forrás
Hivatkozás
Jóváhagyás
Áttekintés
Kiegészítve
Hivatkozik rá
Creative Commons licensz
