Parlagfű pollenexpozíció korai hatásainak vizsgálata

Fájlok
Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

Az allergiás légúti gyulladásban már évtizedek óta ismert az allergénként viselkedő pollen fehérjék szerepe, azonban a pollenszemcsék nagyszámú nem-allergén fehérjét és nem fehérje alapú komponenst is tartalmaznak, melyeknek az allergiás reakció beindításában, fenntartásában és modulációjában betöltött szerepe nem kellően tisztázott. Kimutatták, hogy a parlagfű, és számos más allergiát okozó növényi pollen jelentős mennyiségű NADPH-oxidáz enzimet tartalmaz, amely enzimek a pollen hidratációjának hatására aktiválódnak és reaktív oxigén származékokat (ROS) termelnek. Vizsgálataink során a parlagfű (Ambrosia artemisiifolia) pollennek a légutak hámsejtjeire kifejtett hatását vizsgáltuk. Ehhez egy humán bronchoepiteliális sejtvonalat, a BEAS-2B-t használtuk. A parlagfű pollen ROS-képző kapacitásának meghatározása, egy redox-szenzitív fluoreszcens festék, a H2DCF-DA felhasználásával, fluoriméterrel történt. A parlagfű pollen BEAS-2B sejtekre gyakorolt hatásainak vizsgálata során az előzetesen H2DCF-DA-val feltöltött sejteket hidratálódott, intakt parlagfű pollenekkel kezeltük, különböző sejtfelszíni vagy citoplazmatikus receptorok és enzimek (PAR-1/2, TLR2, Dectin-1, COX-2) inhibitorainak jelenlétében és hiányában. A hámsejtekben kialakuló intracelluláris kalcium szint változások detektálása Fluo4-AM festék felhasználásával, fluoriméterrel történt. A sejtekből kijutó oxidált guanozin (8-OHdG), valamint a termelt IL-6 citokin és IL-8 kemokin mennyiségét ELISA módszerrel határoztuk meg. A mitokondriális ROS termelés mérése MitoSOX festék felhasználásával történt. Az eredmények alapján a parlagfű pollen két fázisban képes oxidatív stresszt létrehozni a légúti hámsejtekben. A kezdeti fázisban a pollen eredetű ROS okozza az oxidatív stresszt, majd a ROS termelést hámsejt eredetű, intracelluláris mechanizmusok veszik át, kalcium-szignál dependens módon. A parlagfű pollen komplex módon, többféle receptor / szignálútvonal aktiválásával indukálhatja a hámsejtek ROS termelését. A PAR-1/2, TLR2, Dectin-1 gátlás önmagában kismértékben, míg a COX gátlás szignifikánsan csökkentette a késői fázisú oxidatív stressz intenzitását. A sejtek IL-6 és IL-8 termelése szignifikáns mértékben csökkent antioxidánsok hatására, vagy az intracelluláris kalcium-szignál gátlása esetén. A parlagfű pollen kezelés hatására a mitokondriális ROS termelés mértéke nem változott szignifikánsan, így a mitokondriumok kizárhatók, mint a késői fázisú oxidatív stressz forrásai.

Leírás
Kulcsszavak
allergia, oxidatív stressz, parlagfű, légúti gyulladás
Forrás