Endothelsejtek trombin képző potenciáljának vizsgálata

Abstract

Célunk, egy olyan módszernek a beállítása volt, mely segítségével kísérleti körülmények között mimikálni és vizsgálni tudjuk a különböző ágensek hatására bekövetkező endothelsejt aktiváció vagy apoptózis indukált trombin képződést. Munkánk során humán koronária artéria endothelsejtvonal felhasználásával vizsgáltuk a trombin képződés folyamatát fluoreszcens trombin specifikus szubsztrát segítségével. Vizsgáltuk a mérésen belüli és mérések közötti reprodukálhatóságot, valamint az endothelsejtek konfluenciájának hatását a trombin képződésre. Továbbá eltérő szöveti faktor és foszfolipid összetételű reagensek felhasználásával megvizsgáltuk, hogy egy proinflammatórikus citokin a TNF-α miként befolyásolja az endothelsejtek trombin képző potenciálját. Az általunk beállított tesztben a mérésen belüli és mérések közötti reprodukálhatóság is megfelelően kicsi variációs koefficiens értékel volt jellemezhető. Az endothelsejt konfluencia csak 100 %-os értéknél befolyásolta a képződő trombin mennyiségét. A TNF-α-val történő kezelés során 4 óra elteltével rövidült a trombin képződés megindulásához szükséges időparaméter (Lagtime), míg a 24 órás kezelés után már a képződő trombin összmennyisége (ETP) is megemelkedett.