Új típusú nukleozid analóg vegyületek toxikológiai vizsgálata

Abstract

Újonnan előállított nukleozid analóg vegyületek toxikológia vizsgálatát végeztem el tumoros:SCC és nem tumoros:HaCaT sejtvonalakon. Az MTT tesztek alapján kiválasztottam a legjobb IC50 értékkel jellemezhető vegyületet, azt amelyiknél kellően nagy volt a különbség a tumoros és nem tumoros sejtek esetében. Ezt követően a Time-lapse Imaging videomikroszkópos felvételek alapján megvizsgáltam, hogy milyen esetleges morfológiai, generációs időbéli, sejtméretbéli és növekedésbéli változásokat okozhat az adott vegyület. Megfigyelhettem továbbá a vegyület esetleges apoptózis/nekrózis indukáló hatásait is. Az alkalmazott rendszer legnagyobb előnye, hogy valós időben, folyamatosan nyomon követhettem az adott sejtpopuláció viselkedését. A legjobb nukleozid analóg hatásának fluoreszcens mikroszkópiás vizsgálatát is elvégeztem. Az IC50 értéknek megfelelő koncentrációban kezelt mintákon a megfelelő fixálási protokollt alkalmazva DAPI festést végeztem. Ennek segítségével az esetleges sejtmagbéli eltéréseket tudtam detektálni a kontroll és kezelt minták összehasonlítása során. Az MTT-assay elvégzését követően kapott eredményeket a GraphPad segítségével értékeltem ki. Az LTS rendszerrel készített felvételeket, valamint a fluoreszcens képeket a Fiji nevű szoftver segítségével értékeltem ki.