Molekuláris interakciómérések szöveteken Pannoramic Confocal automata patológiai szkennerrel
Fájlok
Dátum
Authors
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
DOI
Absztrakt
A dolgozat célja a molekuláris kölcsönhatások, különösen az EGFR és az integrin β1 közötti interakciók vizsgálatához szükséges módszerek fejlesztése a Pannoramic Confocal automata patológiai szkenneren. A Glioblastoma Multiforme (GBM) esetében ezeknek az interakcióknak a mértéke jobb prognosztikus markernek bizonyult, mint a puszta expressziós szintjük. A vizsgálatok alapja a Förster Rezonancia Energia Transzfer (FRET) módszer, amely nanométeres távolságban lévő fluorofórok közötti energiaátadást mér. A dolgozatban BSA-alapú, donor-akceptor festékkel konjugált standard tárgylemezeket fejlesztettünk az α kalibrációs faktor pontos meghatározására, amely elengedhetetlen a FRET hatásfok korrekt számításához. Ezeket a standardokat lézerpásztázó konfokális mikroszkóppal validáltuk, majd a kapott adatokkal kalibráltuk a Pannoramic Confocal rendszert. Az eredmények szerint a Pannoramic Confocal a megfelelő szoftveres korrekciókkal képes FRET mérésekre, mind sejttenyészeteken, mind szövettani metszeteken. A módszer gyors, költséghatékony és megbízható alternatívát nyújthat a molekuláris interakciók diagnosztikai célú vizsgálatában.