Humán hőtermelő zsírszöveti területek génkifejeződési profiljának vizsgálata

Abstract

Kísérleteink során a szubkután és mély nyaki preadipociták és teljes zsírszövet lizátumok génexpressziós profiljának vizsgálatával, valamint a fehér (szubkután) és barna (mély nyaki) zsírszövet biopsziák hematoxilin-eozin és UCP1 specifikus immunfestésével foglalkoztunk. A nyaki műtétek során eltávolított zsírszöveti mintákat, valamint az azokból izolált és tenyészett zsírsejt előalakokat TRIZOL reagensben lizáltuk. Ezekből a mintákból RNS-t szeparáltunk, majd reverz transzkripció segítségével az RNS cDNS-sé való átírását végeztük. Célunk az volt, hogy nyaki régióból származó szubkután és a mély nyaki („deep neck”) régióból nyert zsírszöveti mintákból a különböző zsírszöveti marker gének kifejeződését vizsgáljuk, melyet kvantitatív PCR reakció segítségével végeztünk. A nyaki műtét során eltávolított minták egy részét paraffinba ágyaztuk, majd paraffinos blokkot és mikrotóm segítségével metszeteket készítettünk. A metszeteket hematoxilin-eozinnal megfestettük, valamint UCP1 specifikus immunhisztokémiai jelölést végeztünk. Célunk az volt, hogy a donorok nyaki régiójából származó szubkután és mély nyaki régiójából nyert zsírszövetek közötti morfológiai különbségeket, valamint az UCP1 fehérje kifejeződésének mértékét vizsgáljuk.