A keringő miRNS expressziós profiljának elemzése nyálmintákban neoadjuváns kemoradioterápiát követően végbélrákos betegpopulációban, új generációs szekvenálás alkalmazásával

Fájlok
Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

A lokoregionálisan kiterjedt végbélrák kezelésében a neoadjuváns, konkuráló kemoradioterápia (CCRT) standard terápiás eljárás, azonban a kezelésre adott válasz egyénenként gyakran jelentős eltéréseket mutathat. A heterogenitás összhangban áll azzal a molekuláris biológiai változatossággal, amelyet egyre intenzívebben vizsgálnak és tárnak fel a rektum adenokarcinomában. A genetikai mutációk és a kóros epigenetikai módosulások kulcsszerepet játszanak a daganat kialakulásában és a terápiás rezisztencia megjelenésében. Vizsgálatunk célja a nyálban mérhető, egészséges és beteg csoportok között, valamint sugárterápia előtt és után differenciáltan expresszálódó miRNS-ek azonosítása, továbbá, hogy a miRNS-expressziós profil miként szolgáltathat objektív információt a sugárterápia hatásairól a tumor regressziós fokozat alapján. A vizsgálatba 11 végbélrákban szenvedő beteget vontunk be, akik standard dózisú, konkuráló kemoradioterápiában részesültek. Nyálmintáikat az első kezelési frakció előtt és az utolsó frakció után gyűjtöttük, kontrollcsoportként pedig 20 egészséges önkéntes mintáit elemeztük. A teljes kohorszban (n=31) nagy áteresztőképességű kis transzkriptom-szekvenálást végeztünk és RNS-t izoláltuk. A kis RNS-könyvtárak előállítása standard protokoll szerint történt, majd bioinformatikai elemzést végeztünk, és a differenciálisan expresszált miRNS-eket RT-qPCR-rel validáltuk. Az elemzés során 154 miRNS-t azonosítottunk, amelyek mind az egészséges, mind a beteg mintákban 10 RPM feletti expressziót mutattak. További elemzés 37 olyan miRNS-t tárt fel, amelyek expressziója szignifikánsan különbözött a végbélrákos betegek és az egészséges önkéntesek között. A kezelés hatására 7 miRNS expressziója változott szignifikánsan. 5 miRNS-nél az RT-qPCR vizsgálatok megerősítették a differenciális expressziót, alátámasztva a szekvenálási adatok érvényességét. A hsa-miR-203a-3p, a hsamiR200a-5p és a hsa-miR-361-5p expressziós szintje szignifikáns képességet mutatott a tumorregressziós fokozatok elkülönítésében (AUC>0,7), ami potenciális prognosztikai alkalmazásukat valószínűsíti. Eredményeinkből következtethetünk arra, hogy a nyálban mérhető miRNS-ek alkalmasak lehetnek a neoadjuváns CCRT terápiás hatásának monitorozására végbélrákos betegekben. A nyálminták elemzése nem invazív és ismételhető, így a nyálban azonosított miRNS-ek potenciális biomarkerként szolgálhatnak a személyre szabott terápia és a terápiás válasz monitorozása céljából.

Leírás
Kulcsszavak
mikroRNS, rectum carcinoma, neoadjuváns konkuráló kemoradioterápia, tumorregressziós fokozat
Forrás