Angiotenzin-konvertáló enzim: a gyógyszeres terápia labordiagnosztikát befolyásoló hatása és enzimaktivitás mérés vizeletben

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorFagyas, Miklós
dc.contributor.authorSzabó, Attila Ádám
dc.contributor.authorvariantAttila Ádám
dc.contributor.departmentLaki Kálmán doktori iskolahu
dc.contributor.submitterdepÁltalános Orvostudományi Kar::Kardiológiai Intézet::Klinikai Fiziológiai Tanszék
dc.date.accessioned2026-09-02T05:24:13Z
dc.date.available2026-09-02T05:24:13Z
dc.date.defended2026-09-16
dc.date.issued2026
dc.description.abstractAz angiotenzin-konvertáló enzim (ACE) különleges helyet foglal el a klinikai gyakorlatban. A szarkoidózis legszélesebb körben alkalmazott szérum biomarkere, vizeletben mért aktivitása pedig különböző vesekárosodások potenciális jelzője lehet. Ezzel párhuzamosan a kardiovaszkuláris betegségek kezelésében alkalmazott reverzibilis gátló gyógyszerek elsődleges terápiás célpontja, továbbá az enzimaktivitást mind szérumban, mind vizeletben endogén inhibitorok befolyásolják. Ezen exogén és endogén hatások a laboratóriumi eredmények félrevezető értelmezéséhez vezethetnek. Célunk olyan biokémiai módszerek kidolgozása volt, amelyek képesek az ACE-aktivitás mérését befolyásoló interferenciák objektív felismerésére vagy kiküszöbölésére, ezáltal javítva a biomarkerek klinikai értékét. Igazoltuk, hogy a hagyományos, 35-szörös hígításon mért szérum ACE-aktivitás nem alkalmas az ACE-gátló gyógyszerhatás felismerésére, mivel a kezelt és nem kezelt betegek értékei jelentősen átfednek. Kimutattuk, hogy a 4-szeres és 400-szoros hígításokon mért aktivitásokból számított ACE-gátlási arány egyetlen szérummintából, klinikai gyógyszerelési adatok nélkül is objektíven jelzi az ACE-gátló hatást. A módszer alkalmazásával 1823 szarkoidózis gyanújával vizsgált betegek mintegy 17%-ában találtunk biokémiai bizonyítékot gyógyszerinterferenciára, ami a probléma korábban feltételezettnél nagyobb jelentőségére utal. Vizsgálataink során kimutattuk, hogy a vizelet ACE-aktivitását elfedő endogén inhibitorok <5 kDa molekulatömegűek, reverzibilis gátlószerek, és fő komponensekként az ureát, a húgysavat és az urobilinogént azonosítottuk. Ezekre az eredményekre alapozva kidolgoztunk egy hígítás alapú fluoreszcens kinetikus esszét, amely az endogén inhibitor hatás kiküszöbölésével lehetővé teszi az uACE-aktivitás kvantitatív mérését. Meghatároztuk a mérés preanalitikai feltételeit, kimutattuk, hogy az enzim aktivitása fagyasztás hatására megszűnik, valamint alátámasztottuk a kreatininre történő normalizálás indokoltságát. Klinikai mintákban igazoltuk, hogy az uACE/kreatinin hányados ACE-gátló kezelés mellett szignifikánsan alacsonyabb, így az non-invazív indikátora lehet a farmakológiai gyógyszerhatásnak és a terápia adherenciának. Eredményeink rámutatnak, hogy az enzimaktivitás alapú biomarkerek értelmezhetőségét alapvetően a mérési körülmények és interferenciák ismerete határozza meg. Megfelelő analitikai stratégia alkalmazásával ezen biomarkerek diagnosztikai hozzáadott értéke és klinikai haszna érdemben növelhető.
dc.description.abstractAngiotensin-converting enzyme (ACE) holds a distinct role in clinical practice. It represents the most widely used serum biomarker of sarcoidosis, and its urinary activity may serve as a potential indicator of various renal injuries. At the same time, the enzyme is the primary therapeutic target of the reversible ACE inhibitors used in the treatment of cardiovascular diseases, and its enzymatic activity is influenced by endogenous inhibitors in both serum and urine. These exogenous and endogenous effects may lead to misleading interpretation of laboratory results. Our aim was to develop biochemical methods capable of objectively identifying or eliminating interferences affecting ACE-activity measurements, thereby improving the clinical applicability of the biomarkers. We demonstrated that conventional serum ACE-activity measurement at 35-fold dilution is unsuitable for recognizing ACE inhibitor drug effects, as values of treated and untreated patients substantially overlap. We showed that the ACE inhibition ratio calculated from activities measured at 4-fold and 400-fold dilutions objectively indicates ACE inhibitor effect from a single serum sample, even without clinical medication data. Using this method, biochemical evidence of drug interference was detected in approximately 17% of 1823 patients investigated for suspected sarcoidosis, suggesting a greater magnitude of the problem than previously assumed. We further demonstrated that endogenous inhibitors masking urinary ACE-activity are reversible, <5 kDa molecules, and identified urea, uric acid and urobilinogen as principal components. Based on these findings, we developed a dilution-based fluorescent kinetic assay enabling quantitative measurement of uACE-activity by eliminating endogenous inhibitory effects. We established the preanalytical conditions of measurement, showed that enzymatic activity is abolished by freezing, and substantiated the rationale for normalization to creatinine concentration. In clinical samples, uACE to creatinine ratio proved significantly lower during ACE inhibitor therapy, indicating its potential as a non-invasive marker of pharmacological drug effect and therapy adherence. Our results demonstrate that the interpretability of enzyme activity-based biomarkers fundamentally depends on the recognition of measurement conditions and interferences. With appropriate analytical strategies, their diagnostic added value and clinical usefulness can be substantially improved.
dc.format.extent69
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/414561
dc.language.isohu
dc.language.isoen
dc.subjectACE-aktivitás, ACE-gátló terápia, angiotenzin-konvertáló enzim, biomarker, endogén ACE-gátlás, húgysav, interferencia, laboratóriumi diagnosztika, szarkoidózis, urea, urobilinogén, vizelet ACE
dc.subjectACE activity, ACE inhibitor therapy, angiotensin-converting enzyme, biomarker, endogenous ACE inhibition, uric acid, interference, laboratory diagnostics, sarcoidosis, urea, urobilinogen, urinary ACE
dc.subject.disciplineElméleti orvostudományok
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleAngiotenzin-konvertáló enzim: a gyógyszeres terápia labordiagnosztikát befolyásoló hatása és enzimaktivitás mérés vizeletben
dc.title.translatedAngiotensin-converting enzyme: the impact of drug therapy on laboratory diagnostics and the measurement of enzyme activity in urine
dc.typePhD, doktori értekezéshu
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nincs kép
Név:
Szabó_Attila_Ádám_ertekezes.pdf
Méret:
7.54 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Szabó_Attila_Ádám_magyar tezis.pdf
Méret:
3.3 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Szabó_Attila_Ádám_angol tezis.pdf
Méret:
3.28 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Nincs kép
Név:
Szabó_Attila_Ádám_meghivo.pdf
Méret:
87.02 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
1.93 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Laki Kálmán Doktori Iskola