IL-15 receptor ⍺ és ß alegységek lokalizációjának mikroszkópos vizsgálata transzprezentációban

Abstract

A diplomamunkám során az interleukin-15 receptor α alegységének lokalizációját vizsgáltuk a transzprezentáció folyamatában. Ez a jelenség az antigénprezentáló sejtek és a T- vagy NK-sejtek közötti kapcsolat során valósul meg, a receptor alegységek összeállása létfontosságú jelátviteli folyamatokat indít be a sejt túlélése és proliferációja érdekében. A modellrendszerhez EGFP-IL-15Rα-val transzdukált Raji B-sejteket, valamint a receptor β és γc alegységeit kifejező Jurkat T-sejteket használtunk. A konfokális mikroszkópos vizsgálatokhoz egy egyedi mintafelviteli technikát dolgoztunk ki egy 8 µm-es pórusú membránnal ellátott Boyden kamra segítségével. Ezzel a módszerrel lehetőségünk nyílt az immunszinapszist kialakító sejtek receptor-eloszlásának vizsgálatára közvetlenül a szinapszis síkjában. A megfigyeltük, hogy a sejtek a pórusokon keresztül, a membránvastagságot áthidalva is képesek kapcsolatot létesíteni, és IL-15 citokin jelenlétében az α alegységek dúsulnak a szinapszis közelében. Ez a dúsulás biztosítja, hogy az IL-15 jelátvitel irányított, erős és szelektív legyen, ami fokozza a specifikus aktivációt. Végezetül, a Gibson Assembly módszerrel és retrovirális transzdukcióval egy új, HaloTag-elt β alegységet kifejező Jurkat sejtvonalat hoztunk létre, amely a jövőben lehetőséget ad az α és β alegységek szimultán vizsgálatára.