Candida auris YAP1 deléciós mutáns elkészítése

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorPapp, László Attila
dc.contributor.authorRácz, Dominika Veronika
dc.contributor.departmentDE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2024-06-24T10:07:34Z
dc.date.available2024-06-24T10:07:34Z
dc.date.created2024-04-23
dc.description.abstractA Candida auris a Saccharomycetes osztályba tartozó Ascomycetes élesztőgomba, amely a Clavispora kládhoz tartozik, a többi Candida fajjal együtt. A YAP1 a bZIP transzkripciós faktorok AP-1 alcsaládjába tartozik. Ez a transzkripciós faktor elengedhetetlen a patogén szervezetek oxidatív stressz elleni védekezéséhez Mivel a C. glabrata-ban a YAP1 hiánya oxidatív stressz érzékenységet eredményezett, ezért tűztük ki célul, hogy a rokon C. auris-ból eltávolítjuk a YAP1-et kódoló gént, hogy megvizsgáljuk a gén oxidatív stresszben betöltött szerepét A célom eléréséhez elsőnek a C. auris genomi DNS-ét izoláltam. Előre megtervezett primerek segítségével felszaporítottam a YAP1 gént, illetve a szegélyi régióit. A deléciós konstrukcióhoz szükséges szelekciós markert (NatMX6) összeállítottam, mely lehetővé teszi a nourseothricin-en történő szelektív szaporítást. „Joint PCR” -rel létrehoztam a YAP1 delta konstrukcióját, mely az eredeti genomi környezet 450-450 bázispárjával határolva tartalmazza a NatMX6 marker gént. Később ezt a konstrukciót pJET1.2 vektorba építettem be, amelyet E. coli sejtekbe ligáltam. Ampicillin tartalmú táptalajon történő szélesztés után kolónia PCR-rel a klónozási protokoll transzformációs lépése után keletkezett baktériumkolóniáknál ellenőriztem, hogy a beépült vektor tartalmazza-e a cél génemet. Majd megtisztítottam és felszaporítottam a létrehozott YAP1 delta konstrukciót, amit végül elektroporátorral transzformáltam a C. auris sejtekbe.
dc.description.courseBiológia
dc.description.degreeBSc/BA
dc.format.extent39
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2437/374765
dc.language.isohu
dc.rights.accessHozzáférhető a 2022 decemberi felsőoktatási törvénymódosítás értelmében.
dc.subjectCandida auris
dc.subjectdeléció
dc.subjectYAP1
dc.subjectOxidatív stressz
dc.subjectPatogén gomba
dc.subject.dspaceBiológiai tudományok
dc.titleCandida auris YAP1 deléciós mutáns elkészítése
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nem elérhető
Név:
Rácz Dominika Veronika-Candida auris YAP1 deléciós mutáns elkészítése.pdf
Méret:
1.45 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Szakdolgozat
Megjelenítés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nem elérhető
Név:
license.txt
Méret:
2.35 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Biológiai és Ökológiai Intézet)