Szerkezetmeghatározási módszerek alkalmazása cianobakteriális toxinok és szintetizált biológiailag aktív vegyületek körében

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBorbély, György
dc.contributor.authorFejesné Tóth, Eszter
dc.contributor.authorvariantTóth, Eszter
dc.contributor.departmentElméleti orvostudományok doktori iskolahu
dc.contributor.submitterdepDE--TEK--Természettudományi Kar -- Növénytani Tanszék
dc.date.accessioned2007-11-21T16:46:17Z
dc.date.available2007-11-21T16:46:17Z
dc.date.created2007en
dc.date.defended2007-06-26
dc.description.abstractEredményeink összefoglalásaként elmondható, hogy sikerült megvalósítani a Balatonból származó Cylindrospermopsis raciborskii (BGSD 266) cianobaktérium nevelését laboratóriumi körülmények között, amely lehetővé tette tömegtenyészetek előállítását. A tenyészetből kromatográfiás eljárásokkal sikerült egy új növényi inhibítort izolálni, az általunk bevezetett szilikagéles tisztítás és vékonyrétegkromatográgiás nyomkövetés lényegesen megnövelte az izolálás hatásfokát. Szerkezetvizsgálati módszerekkel (NMR- és IR-spektroszkópia, MS) sikerült javaslatot tenni az izolált növényi inhibítor szerkezetére, melynek kémiai neve: 4-amino-5,10-dihidroxi-9-(hidroximetil)-13-imino-11-metoxi-6-metil-5,6,7,a,9,10,11,11a,13-oktahidropirano [2,3-j]pirimido[4,5-e][1,9,3]dioxaazacikloundecin-2(3H)-on, a vegyületnek acilindrosper-mopsziciklin (CYC) triviális nevet adtuk. Mustárnövénnyel végzett kísérleteink rámutattak arra, hogy az izolált anyagcseretermék gátolja a mustár növekedését, IC50 értéke 600 μg/ml. A fehérjegélelektroforézissel végzett kísérleteink alapján elmondható, hogy a tisztított cianotoxin hatására új fehérjék jelennek meg. A cianotoxin hatására csökken a mustár ssDN-ázának és a savas proteázénak aktivitása. A Cylindrospermopsis raciborskii törzs tápanyagéheztetése (foszfor-, illetve kénmegvonás) a tenyészet növekedésének csökkenését idézi elő. A tápanyagmegvonás hatására csökken az általunk izolált cianotoxin mennyisége, melyet vékonyrétegkromatográfiás módszerrel határozunk meg. A Kis-Balatonból 2001-ben izolált Microcystis aeruginosa szervezetből sikerült izolálni négy mikrocisztint, melyek szerkezetét tömegspektometriás módszerrel határoztuk meg. Az izolált mikrocisztinek a következők voltak: [Dha7]MCYST-FR, MCYST-Hi1R, MYCST-LY és [D-Ser7]MCYST-EE(OMe). Sikerült előállítani a pterokarpán váz hét különböző deuterált analógját, melyek az irodalomban eddig még le nem írt vegyületek. A deuterált származékok tömegspektrometriai vizsgálatával a természetes anyag fragmentációs útvonalát sikerült feltérképezni, megállapítottuk hogy a molekula jellegzetes fragmensei a következők: molekulaion, [M-H+]ion, [M-OH]+ ion, pirillium-kation és benzofurán-gyökkation. ----- Summarizing our result we conclude that culturing of the cyanobacterium Cylindrospermopsis raciborskii (BGSD 266) isolated from Lake Balaton can be successfully performed under laboratory circumstances. From C. raciborskii we have isolated a new plant growth inhibitor, named to vylindrospermopsicyclin using chromatographic techniques. The purification method involves silica gel and the thin-layer chromatography introduced by us has significantly increased the efficiency of the isolation. The chemical structure of cylindrospermopsicyclin has benn identified using structure methods (NMR and IR spectroscopy and MS). The newly isolated molecule has molecular mass of 413 Da. The chemical name of cylindrospermopsicyclin is 4-amino-5,10-dihydroxy-9-(hydroxymethyl)-13-imino-11-methoxy-6-methyl-5,6,7,a,9,10,11,11a,13-octahydropyrano [2,3-j]pyrimido[4,5-e][1,9,3]dioxaazacyclo-undecin-2(3H)-one. For trivial name cylindrospermopsicyclin (CYC) was choosen. Experiment showed that isolated metabolite inhibits the growth of the mustard plant with the IC50 value of 600 μg/ml. By the protein gelelctrophoteric studies it can be concluded that the purified cyanotoxin induces new proteins. The cyanotoxin decreases the activity of the ssDNase and acidic protease of the mustard. Nutrient starvation (deprivation of phosphorous or sulfur) of the strain C. raciborskii induces fall-off in the growth of the culture. The amount of cyanotoxin produced by the culture (determined by thin-layer chromatography) also decreased under nutrient starvation conditions. In a separate study we have isolated four microcystins ([Dha7]MCYST-FR, MCYST-Hi1R, MYCST-LY és [D-Ser7]MCYST-EE(OMe)) from the organism Microcystis aeruginosa isolated in 2001 from Kis-Balaton Reservoir. The structures of these microcystins have been identified by mass spectrometry. We have successfully synthesized seven deuterated analogues of pterocarpan. By mass spectrometric studies the fragmentation pathway of the natural compound has been mapped.en
dc.format.extent124en
dc.format.extent599770 bytes
dc.format.extent565798 bytes
dc.format.extent109236 bytes
dc.format.extent5680706 bytes
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.opachttp://webpac.lib.unideb.hu:8082/WebPac/CorvinaWeb?action=cclfind&resultview=longlong&ccltext=idno+bibDEK00634297
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/3021
dc.language.isohuen
dc.language.isoenen
dc.subjectBalatonen
dc.subjectCylindrospermopsis raciborskiien
dc.subjectacilindrosper-mopsziciklinen
dc.subjectcylindrospermopsicyclinen
dc.subjectkromatográfiaen
dc.subjectchromatographyen
dc.subject.disciplineElméleti orvostudományokhu
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudomány::Orvosi mikrobiológiahu
dc.subject.meshCyanobacteriaen
dc.subject.meshCylindrospermopsis -- isolation and purificationen
dc.subject.meshMicrocystisen
dc.subject.meshMicrocystinsen
dc.subject.meshWater Microbiologyen
dc.subject.meshWater -- chemistryen
dc.subject.meshMass Spectrometryen
dc.subject.meshSinapis -- drug effectsen
dc.subject.meshPterocarpansen
dc.subject.meshToxins, Biologicalen
dc.subject.sciencefieldOrvostudományokhu
dc.titleSzerkezetmeghatározási módszerek alkalmazása cianobakteriális toxinok és szintetizált biológiailag aktív vegyületek körébenen
dc.title.translatedApplication of Chemical Structure Analysis methods to Cyanobacterial Toxins and Synthesized Biologically Active Compoundsen
Fájlok
Eredeti köteg (ORIGINAL bundle)
Megjelenítve 1 - 4 (Összesen 4)
Nincs kép
Név:
Fejesne_Toth_Eszter_ertekezes.pdf
Méret:
5.42 MB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Értekezés (magyar)
Letöltés
Nincs kép
Név:
Fejesne_Toth_Eszter_summary.pdf
Méret:
106.68 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Összefoglaló (angol)
Letöltés
Nincs kép
Név:
Fejesne_Toth_Eszter_tezis_angol.pdf
Méret:
552.54 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Tézis (angol)
Letöltés
Nincs kép
Név:
Fejesne_Toth_Eszter_tezis_magyar.pdf
Méret:
585.71 KB
Formátum:
Adobe Portable Document Format
Leírás:
Tézis (magyar)
Letöltés
Engedélyek köteg
Megjelenítve 1 - 1 (Összesen 1)
Nincs kép
Név:
license.txt
Méret:
1.91 KB
Formátum:
Item-specific license agreed upon to submission
Leírás:
Letöltés
Gyűjtemények
Molekuláris Orvostudomány Doktori Iskola