Celluláris migráció vizsgálata time-lapse videómikroszkópia segítségével

Abstract

Egy olyan sejtmigráció megfigyelésére alkalmas elemzési eljárást dolgoztunk ki, mellyel a sejtek mozgása in vitro, fiziológiás körülmények között vizsgálható time-lapse imaging videómikroszkópia segítségével. A time-lapse videómikroszkópiát már évtizedek óta használják kifejezetten biológiai vizsgálatokhoz, a sejtek, illetve sejtalkotók tanulmányozásához. Az egyes gének és specifikus jelátviteli utak hozzájárulásának objektív értékeléséhez, illetve a kémiai és fizikai indukáló tényezők hatásának tanulmányozásához elengedhetetlen a celluláris migráció pontos értékelése, mely igen jelentőssé vált napjainkban a genetikai és radiológiai vizsgálatok miatt. A sejtek mobilitásának megfigyelésére ugyan léteznek más elemzési módszerek, a legtöbbjük azonban nem minden esetben alkalmazható, vagy igen hosszadalmas. A metodika kidolgozásához a Fiji programot használtuk, mely segítségével egy olyan sejtmigráció megfigyelésére alkalmas elemzési metodikát fejlesztettünk ki, amely bármilyen morfológiai változáson átesett sejt követésére is alkalmas anélkül, hogy manuálisan jelölnénk a képeken a sejtek helyzetét. Ezt egy olyan félautomata nyomkövetési rendszer kidolgozásával értük el, amely a „Temporal-Color Code” beépített modul használatán alapul. A kifejlesztett elemzési eljárás megbízható eredményeket ad, és alkalmas a migrációs index, a sebesség és a megtett távolság meghatározására, valamint a pályadiagramok többletinformációval is szolgálhatnak.