Kortizol meghatározás beállítása kemilumineszcens-immunoassay (CLIA) módszerrel

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBhattoa, Harjit Pal
dc.contributor.advisordeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Laboratóriumi Medicina Intézethu_HU
dc.contributor.authorMolnár, Ágnes
dc.contributor.departmentDE--Általános Orvostudományi Karhu_HU
dc.contributor.opponentBalogh, Ádám
dc.contributor.opponentdeptDebreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar::Szülészeti és Nőgyógyászati Klinikahu_HU
dc.date.accessioned2015-06-23T08:21:08Z
dc.date.available2015-06-23T08:21:08Z
dc.date.created2015
dc.description.abstractA glükokortikoid közül a legfontosabb hormon a kortizol, melynek a legfontosabb biológiai hatásai: glükóz oxidáció gátlása, glükóz képzés aminosavakból, glikogén raktározása a májban, szerepe van a stresszre adott válaszban, az intermedier anyagcsere egyes útjainak szabályozásában is részt vesz. A kortizol meghatározása igen fontos a mellékvese rendellenességek diagnosztikájában. A megemelkedett kortizol szint és a napi ciklus hiánya utalhat Cushing-szindrómára, mellékvese tumorra. Az alacsony kortizol szint pedig utalhat elsődleges mellékvese elégtelenségre (Addison-kór, mellékvese hipoplázia) és az ACTH rendszer hibájára. A vizsgálat célja összehasonlítani kortizol mérését a régi RIA módszerrel és az új CLIA módszerrel. A RIA kompetitív immunoassay, a készlet 125I-jelzett. A csövek monoklonális kortizol ellenes antitestekkel vannak bevonva. A csövekbe az inkubáláshoz együttesen kerülnek bele a minták, standardok, kontollok és a 125I-jelzett kortizol (tracer). Az inkubációt követően a csövek folyadéktartalmát ki kell önteni. Ezt követően történik a kötődött anyagok radioaktivitás mérése. Az eredmények értékelése kalibrációs görbe segítségével történik. A CLIA-val történő kortizol mennyiségi meghatározása egy úgynevezett SPALT módszeren alapul. A tesztben a szilárd fázist a kortizol-fehérje konjugátummal bevont mágneses részecskék adják. Emellett szükség van még egy izoluminol származékkal konjugált monoklonális antitestre. Az inkubáció alatt kompeticíó zajlik a jelölt antitest kötőhelyeiért a kortizol és a kortizol-fehérje konjugátum között. Az inkubációt egy mosási lépés követi, melynek célja a nem kötődött komponensek eltávolítása. Ezt követően egy gerjesztő reagens kerül hozzáadásra, amelynek során villanásszerű kemilumineszcenciás reakció indul el. A fényjel egyenesen arányos az izoluminol-antitest konjugátum mennyiségével, melyet nagy teljesítményű foto sokszorozóval kell lemérni. A mennyiségét úgynevezett relatív fény-egységekben (RLU) adjuk meg. A módszer beállításának lépései a következők: kalibráció, kontrollmérés, reprodukálhatóság vizsgálata (rutin hiba, optimális hiba), korrelációs analízis, carry over, interferencia vizsgálata. A vizsgálatok megfelelő eredménnyel zárultak. A LIAISON® analizátor alkalmas rutin diagnosztikai használatra a CLIA módszerrel, az eredmények jól reprodukálhatóak.hu_HU
dc.description.courseorvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai analitikushu_HU
dc.description.courseactnappalihu_HU
dc.description.courselangmagyarhu_HU
dc.description.coursespecOrvosdiagnosztikai laboratóriumi analitikahu_HU
dc.description.degreeBSc/BAhu_HU
dc.format.extent39hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/214591
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectkortizolhu_HU
dc.subjectradioimmunoassayhu_HU
dc.subjectkemilumineszcens-immunoassayhu_HU
dc.subjectAddison-kórhu_HU
dc.subjectCushing-szindrómahu_HU
dc.subjectglükokortikoidhu_HU
dc.subjectszteroid hormonhu_HU
dc.subjectmellékvesekéreghu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Kémiahu_HU
dc.titleKortizol meghatározás beállítása kemilumineszcens-immunoassay (CLIA) módszerrelhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Általános Orvostudományi Kar)