Szuszpenziós sejttenyészetek megfigyelése kapilláris mikroszkóppal és digitális képanalízissel

Abstract

Dolgozatomban egy általunk felépített demonstrációs technológiai modellről számolok be. A kapilláris mikroszkópnak elnevezett modell time-lapse rendszerrel összekötve alkalmas szuszpenziós sejttenyészetek valós idejű megfigyelésére. A rendszer megalkotásánál arra törekedtünk, hogy egyszerű eszközöket és reprodukálható metodikát alkalmazzunk. Munkánk alapjául az eTox munkacsoport által kifejlesztett Long-Term Scan rendszer szolgált, mely egyedileg felépített mikroszkópokból és a megfelelő képrögzítő programból áll. Ahhoz, hogy a rendszer működését alátámasszuk kísérleteket indítottunk egy kiválasztott mintaszervezettel, a Saccharomyces cerevisiae-vel. Két típusú kísérletet indítottunk, az általunk negatív kontrollnak és pozitív kontrollnak hívott kísérleteket. Negatív kontrollnál olyan környezetet biztosítottunk az élesztő sejteknek, melynél nem vártunk különösebb sejtszám változást. Ezzel ellentétbe a pozitív kontrollnál, biztosítva a megfelelő mennyiségű és minőségű tápanyagforrást, növekedésre számítottunk. A kísérletek során kapott képszekvenciákat az ImageJ nevű képelemző szoftverrel kielemezve a kapott adatokat grafikonon tudtuk ábrázolni. Az elvégzett kísérleteknek és a párhuzamos kézi mintavételezéseknek köszönhetően alátámasztottuk, hogy a kapilláris mikroszkóp a tervezett felhasználás szempontjából valós eredményeket szolgáltat. Vizsgálható így szuszpenziós sejttenyészetek számának a változása, a sejtek által elfoglalt terület, és a képeken látható objektumok mérete, az idő függvényében ábrázolva.