A LIMK2 fehérje foszfatáz gátló funkciójának vizsgálata

Abstract

Az eukarióta sejtekben a foszforiláció három hidroxil-csoportot tartalmazó aminosav, a szerin (Ser), a treonin (Thr) és a tirozin (Tyr) oldalláncain valósul meg, a Ser/Thr-specifikus fozfatázok három fő családból állnak: foszfoprotein foszfatázok (PPP), a fémion-függő protein foszfatázok (PPM) és az aszpartát-típusú foszfatázok. A PPP-k közül a protein foszfatáz-1 (PP1) fontos szerepet tölt be a foszfofehérjék foszforilációs szintjének szabályozásában, ami által a sejtfolyamatok szabályozásának meghatározó résztvevője. A PP1 szabályozásában részt vesznek a katalitikus alegységet specifikusan gátló fehérjék, például a CPI-17 fehérjecsalád. A LIMK2-1 fehérje C-terminális szakasza tartalmazza a CPI-17 fehérjében található PHIN domént, ami magába foglalja a Thr596 oldalláncot. a LIMK2-1 fehérje bizonyítottan foszfatázgátló hatással rendelkezik,célunk a treonin oldallánc szerepének vizsgálata a gátló hatásban. Ennek érdekében a fehérje expressziójának megvalósítása BL21 (DE3) RIL és ROSETTA 2 DE3 baktérium sejtekben, majd később tisztítása és különböző biokémia vizsgálatok alkalmazása a terv.