Tranziens Receptor Potenciál Vanilloid 4 (TRPV4) ioncsatorna kimutatása és farmakológiai modulálásának hatásai egér kondrogenikus kultúrákban

Dátum
Folyóirat címe
Folyóirat ISSN
Kötet címe (évfolyam száma)
Kiadó
Absztrakt

A porcszövet egy nagyon nehezen regenerálódó szövettípus, így manapság nehezen kezelhetőek az ilyen jellegű egészségügyi problémák. Kutatásaink során a TRPV4 molekulával dolgoztunk, melynek széles körű expressziója és mutációja okozta szkeletális defektusok jelenleg is a kutatás tárgyát képzik. A vizsgálatokat in vitro nagy sejtsűrűségű, egér micromass kultúrákon végeztük, amelyekben a porcosodási folyamat stádiumait az idő előrehaladtával jól nyomon lehet követni. A TRPV4 jelenlétét a kultúrákon belül immunhisztokémiai módszerrel mutattuk ki. A fehérje expressziós változását farmakonokkal kezelt kultúrákon is vizsgáltuk. Natív fáziskontraszt felvételekkel és klasszikus festési eljárásokkal (hematoxilin-eozin, sDMMK) is elemeztük a kultúrákat. TRPV4 ioncsatorna modulációt követően az egér micromass modell jelentős morfológiai eltéréseket mutat TRPV4 ioncsatorna aktiválás és gátlás során. A kultúra vastagodását, kifejezettebb nodulusokat, keskenyebb internoduláris teret figyeltünk meg az aktivátorral kezelt kultúrákban. Ha a csatornát gátoltuk, a nodulusok kisebbek, határozottabb szegéllyel rendelkeztek. Gátlás során jellegzetes kristályszerű struktúrák jelentek meg a kultúrákban. Úgy gondoljuk, hogy a TRPV4 okozta vázrendszeri defektusok megértéséhez az általunk alkalmazott módszerek közelebb visznek.

Leírás
Kulcsszavak
TRPV4, micromass, kondrogenezis, immunhisztokémia
Forrás