A poli(ADP-ribóz) polimeráz 2 (PARP-2) metabolizmusban betöltött szerepe HepG2 sejtekben

A tétel rövid nézete
dc.contributor.advisorBai, Péter
dc.contributor.authorHollós, Patrik
dc.contributor.departmentDE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai Intézethu_HU
dc.date.accessioned2011-04-27T07:08:49Z
dc.date.available2011-04-27T07:08:49Z
dc.date.created2011-04-26
dc.date.issued2011-04-27T07:08:49Z
dc.description.abstractA poli(ADP)-ribóz polimeráz 2 (PARP-2) egy a 17 eddig felfedezett PARP enzim közül, melyekhez sok biológiai szerep rendelhető, mint például a DNS hibajavítás, spermatogenezis, gyulladásos folyamatok, metabolizmus. Nemzetközi együttműködés keretében kimutattuk, hogy a PARP-2 a SIRT1 enzim promoteréhez kötődik és expressziójának a csökkenése a SIRT-1 mennyiségének növekedéséhez vezet, a PARP-2 tehát a SIRT1 promóterének represszora. A SIRT-1 enzim mennyiségének, vagy aktivitásának a növekedése a katabolizmus túlsúlyának emelkedéséhez vezet. Kimutattuk, hogy a SIRT1 aktivitás megnő PARP-2 knockout egerek harántcsíkolt izomszövetében és májában. Érdeklődésünk középpontjában májsejtekben lejátszódó lipid és- glikogénmetabolizmus változása állt a PARP-2 csendesítése kapcsán. In vivo eredményeink az sugallták, hogy a SIRT1 enzim aktivációján keresztül a májban is megemelkedhet a katabolizmus. Kísérleteinkhez sejtes modellt használtunk, HepG2 sejtekben csendesítettük shRNS technikával a PARP-2 expresszióját. Feltételeztük, hogy a katabolizmus szintjének megemelkedésével párhuzamosan változik a májban, illetve a hepatocitákban tárolt lipid és glikogén mennyisége. Kontroll és shRNS-csendesített sejteken Oil-Red-O festést (ORO), illetve glikogénfestést (PAS) végeztünk. A sejtekben található lipidek mennyisége PARP-2 shRNS kezelés hatására lecsökkent az ORO festés tanúsága szerint. Ezzel párhuzamosan a PARP-2 csendesített sejtekben a glikogén mennyisége szintén lecsökkent, amit PAS festéssel vizsgáltunk. A sejtek PARP aktivitását poli-ADP-ribóz elleni antitesttel való jelöléssel vizsgáltuk. Hidrogén-peroxidos kezelés hatására a kontroll sejtekben jelentős mennyiségű polimer expresszálódott, míg a csendesített sejtekben kevesebb, tehát a sejtek PARP csendesítése jól működött. Eredményeink jó összhangban vannak a PARP-2 génhiányos egerekben tapasztalt változásokkal. További terveink között szerepel a PARP-2 depléció májra gyakorolt biológiai hatásának vizsgálata, ezen csendesített sejtek biokémiai karakterizálása, a SIRT1 és a vele párhuzamosan expresszálódó gének szintjeinek behatóbb elemzése, valamint a sejtek energetikai vizsgálata: NAD+ szint meghatározás, mitkondriumok számának meghatározása.hu_HU
dc.description.correctorgj
dc.description.courseBiológia - szakirány nélkül (dolgozat: DE OEC Vegytani Intézet)hu_HU
dc.description.degreeBschu_HU
dc.format.extent17hu_HU
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2437/105053
dc.language.isohuhu_HU
dc.subjectPARP-2hu_HU
dc.subjectSIRT1hu_HU
dc.subjectPGC1-alfahu_HU
dc.subjectmetabolizmushu_HU
dc.subjectmájhu_HU
dc.subjectglikogénhu_HU
dc.subjectlipidhu_HU
dc.subject.dspaceDEENK Témalista::Orvostudomány::Orvosi vegytanhu_HU
dc.titleA poli(ADP-ribóz) polimeráz 2 (PARP-2) metabolizmusban betöltött szerepe HepG2 sejtekbenhu_HU
Fájlok
Gyűjtemények
Hallgatói dolgozatok (Természettudományi és Technológiai Kar)