Szerző szerinti böngészés "Csortos, Csilla"
Megjelenítve 1 - 20 (Összesen 48)
Találat egy oldalon
Rendezési lehetőségek
Tétel Szabadon hozzáférhető Adaptor proteins in the vascular endotheliumBoratkó, Anita; Csortos, Csilla; Boratkó, Anita; Molekuláris orvostudomány doktori iskola; DE--OEC--Általános Orvostudományi Kar -- Orvosi Vegytani IntézetVascular endothelial cell monolayer acts as a semiselective barrier between blood and the interstitium. Phosphorylation level of many cytoskeleton and cytoskeleton-associated proteins playing crucial role in the EC barrier function is critical to tissue and organ function. ERM-binding phosphoprotein 50 (EBP50) is a phosphorylatable PDZ domain-containing adaptor protein that is abundantly expressed in epithelium but was not yet studied in the endothelium. We found unusual nuclear localization of EBP50 in bovine pulmonary artery endothelial cells (BPAEC). Immunofluorescent staining and cellular fractionation demonstrated that EBP50 is present in the nuclear and perinuclear region in interphase cells. In the prophase of mitosis EBP50 redistributes to the cytoplasmic region in a phosphorylation dependent manner and during mitosis EBP50 co-localizes with protein phosphatase 2A. Furthermore, in vitro wound healing of BPAEC expressing phospho-mimic mutant of EBP50 was accelerated indicating that EBP50 is involved in the regulation of the cell division. Cell cycle dependent specific interactions were detected between EBP50 and the subunits of PP2A (A, C, and Bα) with immunoprecipitation and pull-down experiments. The interaction of EBP50 with the Bα containing form of PP2A suggests that this holoenzyme of PP2A can be responsible for the dephosphorylation of EBP50 in cytokinesis. Moreover, our results underline the significance of EBP50 in cell division via reversible phosphorylation of the protein with cyclin dependent kinase and PP2A in normal cells. TIMAP, TGF-β inhibited membrane-associated protein, is most abundant in endothelial cells with a regulatory effect on the endothelial barrier function, yet little is known about its interacting partners. RACK1, receptor for activated protein kinase C, serves as an anchor in multiple signaling pathways. We found that RACK1 binds to the TIMAP-PP1c complex in endothelial cells. WD1-4 repeats of RACK1 were identified as critical regions of the interaction both with TIMAP and farnesyl transferase. Phosphorylation of TIMAP by activation of the cAMP/PKA pathway reduced the amount of TIMAP-RACK1 complex and enhanced translocation of TIMAP to the cell membrane in vascular endothelial cells. However, both membrane localization of TIMAP and transendothelial resistance were attenuated after RACK1 depletion. Farnesyl transferase, the enzyme responsible for prenylation and consequent membrane localization of TIMAP, is present in the RACK1-TIMAP complex in control cells, but it does not co-immunoprecipitate with TIMAP after RACK1 depletion. Our results suggest that transient parallel linkage of TIMAP and farnesyl transferase to RACK1 could ensure prenylation and transport of TIMAP to the plasma membrane where it may attend in maintaining the endothelial barrier as a phosphatase regulator. A vaszkuláris endotél sejtek szemiszelektív barrierként választják el a keringő vért a környező szövetektől. A jól működő endotél barrier funció fenntartásában számos citoszkeletális és citoszkeleton asszociált fehérje foszforilációja fontos szerepet játszik. Az EBP50 (ezrin-radixin-moesin-binding phosphoprotein 50), egy olyan foszforilálható adaptor fehérje, mely epitél sejtekben magas expressziós szinttel rendelkezik azonban endotél sejtekben még nem vizsgálták. Immunfluoreszcens festéssel, valamint sejtfrakcionálással az EBP50 fehérjét az interfázisban lévő endotél sejtek magi régiójában detektáltuk. A mitózis profázisában foszforiláció-függő módon a sejtek citoplazmájába transzlokálódott és kolokalizáció volt megfigyelhető a protein foszfatáz 2A enzimmel. Az EBP50 foszforilációt utánzó mutánsát expresszáló sejtek gyorsabb in vitro sebgyógyálást mutattak, ami az EBP50 sejtosztódásban betöltött szabályozó szerepére utal. Immunprecipitációs és pull down kísérletekkel sikerült igazolnuk az EBP50 és a PP2A (A, C, és Bα) alegységei közötti sejtciklus függő kölcsönhatást. Eredményeink arra utalnak, hogy a PP2A enzim szerepet játszik az EBP50 fehérje defoszforilálásában normál sejtekben a sejtciklus során. A TIMAP (TGFβ inhibited membrane-associated protein) endotél sejtekben rendelkezik a legmagasabb expressziós szinttel, szerepéről és kölcsönható partnereiről azonban csak keveset tudunk. A RACK1 (Receptor for Activated C Kinase 1) adaptor fehérje, számos jelátviteli útvonalban játszik szerepet. Eredményeink alapján endotél sejtekben a RACK1 a TIMAP-PP1c komplexhez kötődik. A kölcsönhatásban a RACK1 WD1-4 doménjei vesznek részt, melyhez kötődik továbbá a farnezil-transzferáz enzim is. A cAMP/PKA útvonal aktiválásával elért TIMAP foszforiláció csökkentette a RACK1-TIMAP komplex mennyiségét, valamint a TIMAP membránban való feldúsulásához vezetett. A RACK1 depléciójával a TIMAP membránlokalizációja valamint a farnezil-transzferáz enzimmel való kölcsönhatása is megszűnt. Eredményeink alapján a RACK1 adaptor fehérje biztosítja a TIMAP prenilációját az ehhez szükséges farnezil-transzferáz enzimmel való kölcsönhatással.Tétel Szabadon hozzáférhető Cell cycle dependent association of EBP50 with protein phosphatise 2A in endothelial cells(2012) Boratkó, Anita; Gergely, Pál; Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető Cytoskeletal mechanisms regulating vascular endothelial barrier function in response to acute lung injury(2015) Kovács-Kása, Anita; Csortos, Csilla; Verin, AlexanderTétel Korlátozottan hozzáférhető Dephosphorylation of annexin A2 by protein phosphatase 1 regulates endothelial cell barrier(2021) Király, Nikolett; Thalwieser, Zsófia; Fonódi, Márton; Csortos, Csilla; Boratkó, AnitaTétel Szabadon hozzáférhető Differential regulation of alternatively spliced endothelial cell myosin light chain kinase isoforms by p60(Src)(2001) Birukov, Konstantin G.; Csortos, Csilla; Marzilli, Lisa; Dudek, Steven; Ma, Shwu-Fan; Bresnick, Anne R.; Verin, Alexander; Cotter, Robert J.; Garcia, Joe G. N.Tétel Korlátozottan hozzáférhető Ezrin fehérje bakteriális overexpressziójának optimalizálása(2014-05-15T08:22:10Z) Takács, Zsolt; Csortos, Csilla; DE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai IntézetÖsszefoglalás Ismereteink alapján a TIMAP fehérje az endotél barriert szabályozza az ERM fehérjéken keresztül. Escherichia coli baktériumokba transzformáltuk a munkacsoportunk által készített pGEX4T2-ezrin plazmidot és eltérő hőmérsékleteken különböző IPTG koncentrációk alkalmazásával indukáltuk a fehérje expressziót. Az overexpressziót SDS-PAGE és Western blot módszerekkel ellenőriztük. Az ezrin fehérje bakteriális overexpressziójának optimalizálása sikeresnek bizonyult. A fehérje termelése a módszer segítségével nagy mennyiségben kivitelezhető.Tétel Korlátozottan hozzáférhető Fehérje kifejezés, irányított mutáció(2015-05-07) Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető Fehérje kifejezés, irányított mutáció(2016-05-09) Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető Fehérje kifejezése, irányított mutáció(2021) Csortos, Csilla; DE--Általános Orvostudományi Kar--Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetTétel Korlátozottan hozzáférhető Fehérje kölcsönhatások vizsgálata endotél sejtekbenRapcsák, Fanni; Csortos, Csilla; Debreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar; Orvosi Vegytani Intézet; DE--Általános Orvostudományi Kar; Szatmári, István; Debreceni Egyetem::Általános Orvostudományi Kar; Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetA merlin meghatározó szerepet tölt be a tumorszupresszióban. Munkacsoportunk korábban már kimutatta, hogy endotél sejtekben a TIMAP-PP1cβ komplex részt vesz az ERM fehérjék foszforilációs szintjének szabályozásában.A merlin és az ERM fehérjék is a Band 4.1 fehérjecsalád tagja, ezért feltételezhető, hogy endotél sejtekben a TIMAP-PP1cβ komplex a merlin Ser518-as oldalláncának defoszforilációját is katalizálhatja. Munkacsoportunk már korábban kimutatta a merlin fehérjék és a TIMAP közötti kölcsönhatást.Célunk az volt, hogy pull-down módszerrel megállapítsuk, hogy a TIMAP-PP1cβ komplexet a merlin melyik doménje köti ki.Eredményül azt kaptuk, hogy a TIMAP-PP1cβ komplexet a merlin FERM doménje köti ki.Tétel Szabadon hozzáférhető High complexity in the expression of the B' subunit of protein phosphatase 2A0. Evidence for the existence of at least seven novel isoforms(1996) Csortos, Csilla; Zolnierowicz, Stanislaw; Bakó, Éva; Durbin, Steve D.; DePaoli,-Roach, Anna A.Tétel Korlátozottan hozzáférhető A Molekuláris Biológia Eszköztára(2016-03-10) Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető A molekuláris biológia eszköztára(2021) Csortos, Csilla; DE--Általános Orvostudományi Kar--Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet; Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető A Molekuláris Biológia Eszköztára(2015-03-12) Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető Az NHERF2 fehérje bakteriális overexpressziójának optimalizálása(2013-05-23T16:22:25Z) Veress, Roland; Csortos, Csilla; DE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai IntézetAz endotél sejtek összefüggő monolayert alakítanak ki az erek belső falán. Az endotél sejtek rétege elválasztja a keringő vért a szövetektől, és csak bizonyos makromolekuláknak és sejteknek biztosítja az átjárást a véráram és a szövetek között, továbbá szabályozó szerepük van különböző patológiás és élettani folyamatokban is. Az oldott anyagok transzportja az endotéliumon keresztül többféle módon történhet, legjelentősebb a paracelluláris útvonal a sejt-sejt kapcsolatoknál. A vaszkuláris endotéliumban adherens és szoros kapcsolatok/junctionok is találhatóak, melyek fontos szerepet töltenek be a paracelluláris permeábilitás szabályozásában. A citoszkeleton elemeinek átszerveződése megváltoztatja az endotél sejtek alakját, így a sejtek közötti rések méretét, melyeken keresztül a paracelluláris anyagátvitel zajlik. Az endotélium barrier funkcióját többféle jelátviteli útvonal szabályozza, leggyakrabban kinázok (pl. miozin könnyű lánc kináz, protein kináz C, stb.) és foszfatázok (protein foszfatáz 1 és 2A) befolyásolják reverzibilis foszforilációval a sejt-sejt kapcsolatoknál lévő fehérjéket és a citoszkeleton-asszociált fehérjéket. A jelátvitelben részt vevő proteinek gyakran több fehérjéből álló komplexekben képesek működni, melyeket vázproteinek állványoznak fel. A scaffold fehérjék alapvető funkciója a jelátviteli útvonalak komponenseinek egymás közelébe helyezése, fehérje komplexek létrehozása a jelátvitel számára. Több adaptor fehérje tartalmaz PDZ fehérje-fehérje interakciós doméneket. A PDZ domén fehérjék nagyon változatos molekulákkal képesek kölcsönhatni, pl. növekedési faktor-, G-protein kapcsolt-, neurotranszmitter receptorokkal, transzport fehérjékkel, adhéziós molekulákkal, a citoszkeleton elemeivel és transzkripciós faktorokkal. A Na+/H+ Exchanger Regulatory Factor (NHERF) család tagjai nagy mennyiségben jelen vannak az epitéliumban. Az NHERF1 és NHERF2 adaptor fehérjék két tandem PDZ interakciós domént tartalmaznak és egy C-terminális végen lévő ERM-kötő domént, mely az ezrin, radixin és moesin fehérjékkel képes kölcsönhatni. Az ezrin, radixin és moesin az ERM fehérje család tagjai. Szerepük van az aktin és a plazmamembrán kapcsolat kialakításában és fenntartásában, valamint a jelátvitelben részt vevő fehérjék működésének szabályozásában. Az NHERF3 és NHERF4 fehérjékben négy darab PDZ domén található, ERM-kötő doménjük nincs. A család tagjai kölcsönhatnak membrán proteinekkel, ioncsatornákkal, receptorokkal és különböző G-protein kapcsolt receptorokkal is. Továbbá vannak nem membránhoz kapcsolt célpontjai is, még magban lévő fehérjékkel is kölcsönhatnak, és szabályozhatják egyes anyagoknak a sejtmag és a citoplazma közötti ingázását, és/vagy segítik a felépítését és az állványozását a multiprotein transzkripciós komplexeknek, melyek szükségesek a gének aktiválásához. Munkacsoportunk korábban az ERM fehérjéket és azoknak a kötőpartnereit vizsgálta. Az NHERF1, másnéven ERM Binding Phosphoprotein of 50 kD (EBP50) és NHERF2 egyaránt a citoplazmában lokalizálódik az epitélium sejtjeiben, feladatuk vázproteinként a plazmamembrán fehérjék és a citoszkeletális fehérjék közötti kapcsolat kialakítása és fenntartása. Az endotéliumban betöltött szerepük és elhelyezkedésük nem tisztázott, ezért kezdte el a munkacsoportunk komolyabb érdeklődéssel vizsgálni az NHERF1 és NHERF2 fehérjéket endotél sejtekben. Az eddigi eredmények azt bizonyítják, hogy az NHERF2 funkciója az endotél sejtekben jelentősen különbözik az EBP50 funkciójától.Tétel Szabadon hozzáférhető NHERF2 is crucial in ERM phosphorylation in pulmonary endothelial cells(2013) Boratkó, Anita; Csortos, CsillaTétel Korlátozottan hozzáférhető Organic Chemistry For Premedical Students(Debreceni Egyetemi Kiadó – Debrecen University Press, 2011) Erdődi, Ferenc; Csortos, Csilla; DE--Általános Orvostudományi Kar -- Élettani IntézetTétel Szabadon hozzáférhető PP2A Affects Angiogenesis via Its Interaction with a Novel Phosphorylation Site of TSP1(2024) Thalwieser, Zsófia; Fonódi, Márton; Király, Nikolett; Csortos, Csilla; Boratkó, AnitaTétel Korlátozottan hozzáférhető Protein expression site directed mutagenesis(2021) Csortos, Csilla; DE--Általános Orvostudományi Kar--Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetTétel Korlátozottan hozzáférhető Protein Expression Site Directed Mutagenesis(2016-05-10) Csortos, Csilla
- «
- 1 (current)
- 2
- 3
- »