Szerző szerinti böngészés "Kassay, Norbert"
Megjelenítve 1 - 8 (Összesen 8)
Találat egy oldalon
Rendezési lehetőségek
Tétel Szabadon hozzáférhető A humán T-limfotróp leukémia vírus 1, -2 és -3 proteázok biokémiai karakterizálása, valamint dohányfüst toxin és hasnyálmirigy lipáz mutáció, mint krónikus pankreatitisz kockázati tényezők vizsgálata.(2025) Kassay, Norbert; Tőzsér, József; Kassay, Norbert; Molekuláris sejt- és immunbiológia doktori iskola; Általános Orvostudományi Kar::Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetAz első humán patogén retrovírusokat az előző század 80-as éveiben fedezték fel, köztük az 1-es és 2-es típusú humán T-limfotróp vírusokat (HTLV-1, HTLV-2) és az 1-es típusú humán immundeficiencia vírust (HIV-1) is. Ezek közül a legnagyobb figyelmet HIV-1 kapta, mely a szerzett immunhiányos tünetegyüttes (AIDS) betegség kialakulásáért felelős kórokozó. A súlyos megbetegedések a HIV-1 vírussal kapcsolatos kutatások felfutását idézték elő, ezzel elősegítve a HIV-1-ellenes inhibitorok fejlesztését, így mára a HIV-1 fertőzés tünetmentes maradhat. Ezzel párhuzamosan megindultak a HTLV-1 vírussal kapcsolatos kutatások is, amelyek viszont nem zárultak hasonló sikerrel, így a mai napig sincs specifikus terápia az általa kiváltott betegségekre. Az egyik potenciális terápiás támadópont a proteáz, amely a retrovírusok életciklusában esszenciális szerepet tölt be, a HIV-1 ellenes terápiában több proteázgátlót is sikeresen alkalmaznak. A HTLV-2 és HTLV-3 vírusfertőzések kisebb populációkat érintenek, ezért a HTLV-1-nél is kisebb figyelmet kaptak, viszont ezek elterjedése akár egy-egy mutációt követően is gyorsan változhat, ezért szükséges részletesebb vizsgálatuk, így a proteáz tanulmányozása is. A krónikus pankreatitisz egy súlyos, visszafordíthatatlan megbetegedés, amelyet elsősorban az alkoholfogyasztás vagy a dohányzás, valamint kisebb gyakorisággal a pankreász acinus sejtjei által termelődött fehérjékben található mutációk válthatnak ki. A genetikai eredetű megbetegedések hátterében leggyakrabban a kationos tripszin áll, amely inaktív formában szekretálódik az acinus sejtekből, majd a patkóbélben aktiválódik. A korai, pankreászon belüli aktiválódása tünetekkel asszociálható. A tripszin központi szerepet tölt be más emésztőenzimek aktivációjában is. A tripszin, vagy az aktiválandó emésztőenzimek szekvenciájában található egyes mutációk funkciónyerő és funkcióvesztő hatást is okozhatnak, ezért komoly kockázati tényezők lehetnek. A genetikai eredetű megbetegedések másik típusa esetében a betegség kialakulását a pankreász sejtek által termelt fehérjék nem megfelelő feltekeredése okozza. Itt a tripszin nem tölt be központi szerepet és a legtöbb, fiziológiás körülmények között nagy mennyiségben szekretálódó fehérje érintett lehet, így egy általánosabb mechanizmust jelent. Több esetben egy ilyen fehérje jelenléte elegendő a betegség kiváltásához, számos esetben viszont ez nem egyértelműen bizonyított, illetve egészséges egyénekben is kimutathatóak ezek a mutációk. Elképzelhető, hogy a betegség kiváltásához más tényezők is szükségesek, viszont ezzel kapcsolatban még kevés adat áll rendelkezésre.Tétel Szabadon hozzáférhető Biochemical Characterization, Specificity and Inhibition Studies of HTLV-1, HTLV-2, and HTLV-3 Proteases(2021) Kassay, Norbert; Mótyán, János András; Matúz, Krisztina; Golda, Mária; Tőzsér, JózsefTétel Szabadon hozzáférhető Cigarette smoke toxin hydroquinone and misfolding pancreatic lipase variant cooperatively promote endoplasmic reticulum stress and cell death(2022) Kassay, Norbert; Toldi, Vanda; Tőzsér, József; Szabó, AndrásTétel Szabadon hozzáférhető Different Mutation Tolerance of Lentiviral (HIV-1) and Deltaretroviral (BLV and HTLV) Protease Precursors(2022) Mótyán, János András; Kassay, Norbert; Matúz, Krisztina; Tőzsér, JózsefTétel Korlátozottan hozzáférhető Dohányfüst és egy pankreatitisz genetikai rizikófaktor együttes hatásának vizsgálata 293AD sejtekenNemes, Dóra; Szabó, András; Kassay, Norbert; DE--Természettudományi és Technológiai Kar--Biotechnológiai IntézetMunkánk során 293AD sejteken végeztünk életképesség és XBP1 mRNS érés vizsgálatokat. A krónikus pankreatitisz kockázati tényezők legtöbb csoportját (alkoholfogyasztás, dohányzás, genetikai mutációk) érintettük. Egyes dohányfüstöt reprezentáló anyagok (akrolein, hidrokinon és krotonaldehid) hatását vizsgáltuk in vitro, 293AD sejtvonal alkalmazásával az életképesség tekintetében MTT assay módszerrel és vizsgáltuk CTRC mutáció (p.G61R) hatását a 293AD sejtek életképességére.Tétel Korlátozottan hozzáférhető Humán T-limfotróp vírus 1 és 3 proteáz kinetikai paramétereinek összehasonlítása(2013-05-08T12:34:50Z) Kassay, Norbert; Matúz, Krisztina; Tőzsér, József; DE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai IntézetA Humán T-nyiroksejtes limfóma vírus 3 egy 2005-ben Kamerunban felfedezett retrovírus. A retrovírusok deltaretroviridae alcsaládjába tartozik. Közeli rokonságban van a patogén HTLV-1 vírussal. Okozhat neurológiai megbetegedéseket, tumort valamint immundeficienciát is. A legtöbb HTLV vírussal ellentétben azonban képes megfertőzni a CD4+ és CD8+ T-sejteket is. Mint minden retrovírus, így a HTLV-3 életciklusában is kulcsszerepet tölt be a virális proteáz (PR), mely a virális prekurzor fehérjék funkcionális részekre történő hasítását végzi, ezt követően történhet meg a vírus összeszerelődése. Így a proteáz megfelelő célpont lehet a vírus által okozott betegségek kezelésében. Munkánk során célul tűztük ki, a HTLV-3 proteáz kinetikai paramétereinek meghatározását, valamint a HTLV-1 ellen kifejlesztett PR-inhibitorok, az IB268 és IB269 hatásának vizsgálatát. Munkánk során elvégeztük a munkacsoportunk által korábban BL21(DE3) E.coli sejtekbe transzformált HTLV-3 proteáz expressziójának, feltárásának és tisztításának optimalizálását. Az expressziót LB médiumban IPTG általi indukcióval végeztük, a sejtfeltárást deoxikólsav (DOC)- lizozim segítségével végeztük. A HTLV-3 fehérje elválasztására a reverz fázissal analóg-HPLC kromatográfia bizonyult a leghatékonyabb módszernek. Ezt követően vizsgáltuk az enzim kinetikai jellemzőit, HPLC módszer segítségével HTLV-1 és HTLV-3 PR hasítási helyet tartalmazó szintetikus oligopeptid szubsztrátokon, illetve meghatároztuk az enzim relatív aktivitási értékeit a HTLV-1 kapszid-nuklekapszid hasítási helyet tartalmazó P3 helyen módosított szintetikus oligopeptid szubsztrátokon. A gátlásvizsgálatok során mind a két HTLV-1 proteáz inhibitor hatékonynak bizonyult, azonban az IB268 gátló hatása jelentősebb volt.Tétel Szabadon hozzáférhető Missense PNLIP mutations impeding pancreatic lipase secretion cause protein misfolding and endoplasmic reticulum stress(2021) Toldi, Vanda; Kassay, Norbert; Szabó, AndrásTétel Korlátozottan hozzáférhető Poli(ADP-ribóz) mintázat vizsgálata HEK293T sejtvonalban PARP-1 és PARP-2 siRNS alkalmazásával(2011-05-19T09:12:38Z) Kassay, Norbert; Bai, Péter; DE--TEK--Természettudományi és Technológiai Kar--Biológiai és Ökológiai IntézetPARP-1 és PARP-2 poli(ADP-ribóz) mintázatát vizsgálatuk transzfekciót követően siRNS és scrRNS alkalmazásával.A PARP-1 gátlása a auto-poli(ADP-ribozil)ációs szintjének a csökkenéséhez vezetett. Ami jól korrelál más emlős sejtvonalakon elvégzett hasonló metodikai vizsgálatok eredményeivel. A PARP-2 esetében nem tapasztaltunk változást a sejtlizátumok polimer mintázatában.Ezt a transzfekció sikertelensége okozhatta, tehát a plazmid nem volt képes megakadályozni a PARP-2 mRNS transzlációját.