Szerző szerinti böngészés "Szentirmai, Attila"
Megjelenítve 1 - 6 (Összesen 6)
Találat egy oldalon
Rendezési lehetőségek
Tétel Szabadon hozzáférhető A metabolikus aktivitás becslése Akridinnarancs fluoreszcens festékkel(2001) Karaffa, Erzsébet Mónika; Juhász, Alíz; Szentirmai, Attila; Karaffa, LeventeTétel Szabadon hozzáférhető Az aspergillus nidulans gomba laktóz és galaktóz anyagcseréjének jellemzése és szabályozásaFekete, Erzsébet; Karaffa, Levente; Szentirmai, Attila; DE -- Természettudományi Kar -- Mikrobiológiai és Biotechnológiai Tanszék; Gyógyszertudományok doktori iskolaTanszékünkön a megalakulás óta folynak kutatások a fermentációs ipar szempontjából jelentős mikrobiológiai problémák tudományos igényű magyarázatára. A számos lehetőség közül végül a fonalas gombák élettani, biokémiai és genetikai tanulmányozása nemesedett tanszéki kutatási programmá. Az Aspergillus nidulans-t (teleomorf: Emericella nidulans) egy szisztematikus keresés eredményeként „tették meg” a tömlősgombák (Ascomycota) modellszervezetének a XX. század negyvenes éveiben. Ennek több oka volt: (a) a faj minimál táptalajon, vagyis egyetlen szerves szénforráson, nitrogénforráson, néhány egyszerű són és nyomelemen is képes teljes életciklusát befutni, (b) szinte minden szén- illetve nitrogénforrást képes asszimilálni, lehetővé téve az anyagcsere teljes vertikumának vizsgálatát, (c) életciklusának döntő részében haploid, azonban stabil diploid állapot is kialakítható, (d) nagy mennyiségben képez vegetatív, egymagvú konídiospórákat, s mivel ezek eltérő színűek lehetnek, a különböző genotípusú törzsek szabad szemmel is elválaszthatók, (e) könnyen képez aszkospórákat tartalmazó kleisztotéciumokat is (ivaros szaporodás), ami a kettős mutánsok kialakítását könnyíti meg. A fentiek miatt világszerte rengeteg kutatócsoport vizsgálja az A. nidulans-t, aminek természetes következménye lett az óriási számú mutáns (Clutterbuck 1997), plazmid- és génkonstrukció, melyek a „community”-hez tartozó laborok között szívességi alapon keringenek. További kutatási és technikai lehetőséget jelent az A. nidulans genom teljes szekvenciájának ismerete (8 kromoszóma, 31 Mb). Munkacsoportunk, mely korábban nagy termelőképességű, imperfekt Penicillium és Acremonium chrysogenum törzsekkel foglalkozott, 2000-ben kezdte el az A. nidulans kutatását. Ennek alapvető oka a fenti β-laktám termelők és az A. nidulans anyagcseréje közötti hasonlóság volt (Arst és Penalva 2003). Úgy gondoltuk, az ipari mikrobiológia fontos kérdéseinek A. nidulans-on történő vizsgálata jobb, alaposabb magyarázatokat eredményez majd, mintha a kevésbé ismert biológiájú termelői törzsekkel tennénk ugyanezt. Ezen megközelítés első eredményeit tartalmazza ez a dolgozat, melyben a laktóz és galaktóz anyagcsere általunk feltárt tulajdonságait és szabályozását részletezzük. Ahogy az a tudományban lenni szokott, az eredmények számos új kérdést is felvetnek; ennek ellenére úgy érezzük, sikerült néhányat megismernünk egy régi, de máig jelentős fermentációs ipari szénforrás, a laktóz lebontásának „titkai” közül.Tétel Korlátozottan hozzáférhető Extra- and intracellular lactose catabolism in Penicillium chrysogenum: phylogenetic and expression analysis of the putative permease and hydrolase genes(2014) Jónás, Ágota; Fekete, Erzsébet; Flipphi, Michel; Karaffa, Erzsébet Mónika; Jäger, Szilvia; Molnár, Ákos Péter; Szentirmai, Attila; Karaffa, LeventeTétel Korlátozottan hozzáférhető Inszerciós mutagenezis alkalmazása szterinlebontásért felelős mycobacterium gének megismerésébenAndor, Attila; Szentirmai, Attila; Juhász-Nagy Pál doktori iskola; DE--ATC--Mezőgazdaság- Élelmiszertudományi és Környezetgazdálkodási Kar -- Biomérnöki Tanszék; DE--ATC--Mezőgazdaság- Élelmiszertudományi és Környezetgazdálkodási Kar --A Tn611 transzpozont hordozó pCG79 jelű hőérzékeny ingázó plazmid DNS alkalmazásával inszerciós mutáns könyvtárakat hoztunk létre szterin-hasznosító Mycobacterium smegmatis mc2155 és Mycobacterium phlei M51-Ept törzsekben szterin-átalakító képességben blokkolt mutánsok előállítása céljából. Nagy-áteresztőképességű szűrőmódszerrel 10-10 ezer törzset vizsgáltunk le mindegyik inszerciós mutáns könyvtárból. Összesen 4 törzset találtunk, amelyek szterinlebontó enzimaktivitásai különböztek a szülői törzsekétől. A 4-androsztén-3,17-diont termelő Mycobacterium phlei M51-Ept egyik blokkmutánsa a szitoszterint 23,24-dinorkolánvázas vegyületekké alakította át, amelyek hasznos kiindulási anyagai a kortikoszteroid gyógyszerek szintézisének. A 3-ketoszteroid-9α-hidroxiláz aktivitásban gátolt Mycobacterium smegmatis 10A12 jelű blokkmutáns genomiális DNS-éből egy pFJ92-nek elnevezett rekombináns plazmidot nyertünk ki, amely tartalmazta a kromoszómába integrálódott transzpozont és a kapcsolódó kromoszómális régiókat. A pFJ92 plazmidot használtuk fel a 9α-hidroxilázt kódoló kromoszómális DNS izolálására. Az izolált ORF kódolja a 383 aminosavat tartalmazó 3-ketoszteroid-9α-hidroxiláz enzimet M. smegmatis mc2155-ben, amelyben jelen vannak az IA osztályba tartozó terminális oxigenázokban jellemzően konzervált domének. Az izolált génnel transzformált Escherichia coli képessé vált a szterán váz 9α-hidroxilezésére. Integration of the pCG79 temperature-sensitive plasmid carrying Tn611 was used to generate libraries of mutants with blocked sterol transforming ability of the sterol-utilizing strains Mycobacterium smegmatis mc2155 and Mycobacterium phlei M51 Ept. Of the 10,000 insertional mutants screened from each library, four strains with altered activity of the sterol-degrading enzymes were identified. A blocked mutant of the 4-androstene-3,17-dione-producing M. phlei transformed sitosterol to 23,24-dinorcholane derivatives that are useful starting materials for corticosteroid syntheses. A recombinant plasmid, pFJ92, was constructed from the genomic DNA of one of the insertional mutants of M. smegmatis, 10A12, which was blocked in 3-ketosteroid 9α-hydroxylation and carrying the transposon insertion and flanking DNA sequences, and used to isolate a chromosomal fragment encoding the 9α-hydroxylase. The open reading frame encodes the 383-amino acid terminal oxygenase of 3-ketosteroid 9α-hydroxylase in M. smegmatis mc2155 and has domains typically conserved in class IA terminal oxygenases. Escherichia coli containing the gene could hydroxylate the steroid ring at the 9α-position.Tétel Korlátozottan hozzáférhető Lack of aldose-1 epimerase in Hypocrea jecorina (anamorph Trichoderma reesei): a key to cellulase gene expression on lactose(2008) Fekete, Erzsébet; Seiboth, Bernhard; Kubicek, Christian P.; Szentirmai, Attila; Karaffa, LeventeTétel Korlátozottan hozzáférhető Lactose and D-galactose catabolism in the filamentous fungus Aspergillus nidulans(2008) Fekete, Erzsébet; Padra, János Tamás; Szentirmai, Attila; Karaffa, Levente