A coeliakia (glutén szenzitív enteropátia) egy glutén által indukált krónikus vékonybél rendellenesség, jelentős autoimmun folyamatokkal. A coeliakia specifikus anti-TG2 antitesteknek is szerepe van a betegség kialakulásában és a TG2-autoantitest kölcsönhatás befolyásolása nagy jelentőséggel bír a betegség patomechanizmusának feltárásában. Munkacsoportunk olasz együttműködéssel beteg vékonybél biopsziából teljes RNS-t izolált, ebből cDNS-t készített, majd specifikus primerrel az immunglobulinok variábilis régióit single chain antitest darab (scFv) termelése céljából pDAN5 vektorba klónozta antitest könyvtárat létrehozva. Ebből phage display módszerrel 12 TG2 specifikus valamint két deamidált gliadin ellenes (DGP) klónt szelektáltunk ki, amiben én is részt vettem. Szakdolgozatom készítése során a klónok pDAN3.1/Hygro vektorba való klónozásához az inserteket a PCR optimalizálása után amplifikáltam, és a klónokat restrikciós fragmenthossz analízissel (BstNI és HaeIII enzimekkel) ellenőriztem azt megerősíteni, hogy különbözőek. Ennek további ellenőrzését szekvenálással végeztem, a kapott eredmények alátámasztották a restrikciós fragmenthossz analízissel kapott eredményeket. Továbbá kiderült, hogy 3 klónból két-két példány szelektálódott különböző szelekcióval. Munkám során megállapítottam, hogy bár a szelekció során különböző konformációjú TG2-t vagy azok kombinációját használtuk, ezek a klónok mind a nyitott, mind a zárt formával jól reagálnak, továbbá hogy különböző konformációjú TG2 alkalmazásával is azonos klónok kiválogatódásához juthatunk. Szakdolgozatom folytatásaként a további klónok szekvenálását tervezem. Továbbá a kiválogatott scFv-t tartalmazó vektorok olyan pcDNA3.1/Hygro vektorba klónozását, amelyek már tartalmazzák a humán IgG CH2 és CH3 doménjét, és így CHO sejtekbe transzfektálva képesek úgynevezett „miniantitestek” termelésére. A miniantitestek hatását HUVEC és egér TG2 vad és knockout (KO) fibroblaszt sejtkultúrán és más biológiai rendszerekben tervezem vizsgálni, külön alkalmazva a TG2 R mutánsával reagáló és nem reagáló antitesteket mint két csoportot.